實(shí)驗(yàn)室兩種檢測(cè)小兒巨細(xì)胞病毒方法的比較.pdf

1、前言：
　　人巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)感染在臨床上較為普遍，胎兒以及幼齡兒童由于機(jī)體各器官發(fā)育不成熟，免疫抵抗能力相對(duì)較弱而較容易受到其入侵，其對(duì)患兒的肝臟、呼吸系統(tǒng)以及神經(jīng)系統(tǒng)均存在不同程度的影響，這一方面不利于患兒的健康成長(zhǎng)、甚至引發(fā)死亡，因此對(duì)于小兒巨細(xì)胞病毒感染必須給予高度的重視。對(duì)于巨細(xì)胞病毒感染的關(guān)鍵在于及時(shí)診斷和有效治療，避免病情惡化而出現(xiàn)嚴(yán)重后果。臨床上HCMV培養(yǎng)分離雖為

2、感染確診的金標(biāo)準(zhǔn)，但HCMV分離培養(yǎng)困難，費(fèi)時(shí)耗力，影響及時(shí)治療，故臨床已應(yīng)用較少?，F(xiàn)在臨床上一般采用ELISA法，膠體金法和PCR法檢測(cè)特異性HCMV感染。但關(guān)于膠體金法和PCR法檢測(cè)特異性HCMV感染的敏感性，準(zhǔn)確度系統(tǒng)大樣本比較，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。本文采用遼寧地區(qū)分布的大樣本，就膠體金法和PCR法對(duì)同一標(biāo)本進(jìn)行系統(tǒng)檢測(cè)對(duì)比研究，為臨床準(zhǔn)確檢測(cè)及診斷HCMV感染提供可靠依據(jù)。
　　方法：
　　1.收集臨床上疑似HCMV感染

3、的243例遼寧地區(qū)小兒的血液標(biāo)本和其配對(duì)的尿液標(biāo)本。
　　2.分別采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和膠體金法檢測(cè)這243例患兒外周血巨細(xì)胞病毒水平，得出各自方法的陽(yáng)性率，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。
　　3.根據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)，得出確診患有HCMV感染性疾病的人數(shù)，換算出PCR法和膠體金法對(duì)檢測(cè)HCMV的敏感度，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。
　　4.用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法對(duì)其與血液配對(duì)的243例尿液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，得出用PCR法檢測(cè)尿液HCMV的陽(yáng)性率，在與

4、用PCR法檢測(cè)血液HCMV的陽(yáng)性率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。
　　結(jié)果：
　　1.243例血液標(biāo)本進(jìn)行熒光定量PCR法檢測(cè)HCMV的陽(yáng)性率11.93(29/243)％，243例血液標(biāo)本進(jìn)行膠體金法檢測(cè)HCMV的陽(yáng)性率為6.58(16/243)％。
　　2.在用膠體金法檢測(cè)HCMV的16例陽(yáng)性標(biāo)本中，再用PCR法檢測(cè)HCMV，陽(yáng)性標(biāo)本為16例。
　　3.在用PCR法檢測(cè)HCMV的29例陽(yáng)性標(biāo)本中，再用膠體金法檢測(cè)HCMV,陽(yáng)

5、性標(biāo)本為16例。這16例陽(yáng)性標(biāo)本的HCMV DNA值在2.11×103～4.58×106拷貝/ml之間，平均3.43×105拷貝/ml。而膠體金法檢測(cè)HCMV的13例陰性標(biāo)本，HCMVDNA值在1.25×103～5.30×105拷貝/ml之間，平均2.32×104拷貝/ml。
　　4.兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性率比較，實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)HCMV陽(yáng)性率高于膠體金法檢測(cè)HCMV陽(yáng)性率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　5.兩種

6、檢測(cè)方法敏感性比較，實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)HCMV的敏感性72.5(29/40)％遠(yuǎn)大于膠體金法檢測(cè)HCMV的敏感性40.0(16/40)％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　6.用PCR法檢測(cè)的尿液標(biāo)本的陽(yáng)性率為16.46(40/243)％，而用PCR法檢測(cè)的血液標(biāo)本的陽(yáng)性率為11.93(29/243)％，血液和尿液標(biāo)本HCMV的檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.實(shí)時(shí)熒光定量PC