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文檔簡介
1、目的:
觀察Rg1對過氧化損傷的人臍帶間充質(zhì)干細胞形態(tài)、增殖、衰老、細胞因子分泌、胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達的影響,探討Rg1對人臍帶間充質(zhì)干細胞有無保護作用,修復(fù)損傷的程度及可能的作用機制,以服務(wù)于干細胞治療,為恢復(fù)神經(jīng)損傷等相關(guān)病人的功能找尋途徑。
方法:
取P5至P6代人臍帶間充質(zhì)干細胞,加入不同濃度的Rg1,觀察其對細胞增殖的影響并篩選最適藥物濃度。細胞隨機分為6組:陰性對照組(以3.3×105個/ml細胞密度
2、接種到含50 n g/m L干細胞生長因子、10%胎牛血清、100U/ml青霉素、100U/ml鏈霉素的培養(yǎng)基),模型組(陰性對照組條件下培養(yǎng),細胞融合達80%時加入1.6μM過氧化氫),Rg1由低至高3個劑量組(模型組條件下培養(yǎng)30分鐘后,加入Rg1各0.5μM、4μM、32μM,繼續(xù)培養(yǎng)36小時),陽性對照組(模型組條件下培養(yǎng)30分鐘后,加入220μM維生素C,繼續(xù)培養(yǎng)36小時)。觀察各組細胞的增殖、衰老,培養(yǎng)上清液中TNF-α、丙
3、二醛水平,干細胞中p-p38、p-JNK、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽表達的情況。
結(jié)果:
32μM人參皂苷Rg1組人臍帶間充質(zhì)干細胞增殖率最高。與模型組相比,隨著劑量增加,Rg1組人臍帶間充質(zhì)干細胞增殖增加,衰老均減少,TNF-α、 p-JNK、p-p38、丙二醛表達降低,過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽表達增強,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。陽性對照組上述指標(biāo)介于Rg1高、低劑量之間,差異有統(tǒng)計學(xué)
4、意義(P<0.05)。與陰性對照組比較,模型組、人參皂苷Rg1組及陽性對照組人臍帶間充質(zhì)干細胞增殖降低,衰老增多,TNF-α、 p-JNK、p-p38蛋白、丙二醛表達增加,過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽表達減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
32μM人參皂苷Rg1為促進人臍帶間充質(zhì)干細胞增殖的最適濃度。Rg1可促進氧化損傷的人臍帶間充質(zhì)干細胞增殖,延緩衰老,下調(diào)TNF-α、p-JNK蛋白、p-p3
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