葡萄釀酒酵母催化不對(duì)稱還原制備(R)-扁桃酸.pdf

1、光學(xué)純扁桃酸是一種重要的手性藥物中間體，被廣泛應(yīng)用于多種手性藥物的合成，國(guó)際市場(chǎng)需求增長(zhǎng)較快。利用生物法制備光學(xué)純扁桃酸具有反應(yīng)條件溫和，反應(yīng)速率快，得率高，產(chǎn)品光學(xué)純度高，環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)，成為國(guó)內(nèi)研究的熱點(diǎn)。本研究以葡萄釀酒酵母(Saccharomyces ellipsoideus GIM2.105)水相中催化不對(duì)稱還原制備(R)-扁桃酸((R)-MA)為研究對(duì)象，通過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)基的組成、發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化，提高不對(duì)稱還原反應(yīng)轉(zhuǎn)化效率及

2、穩(wěn)定性，開(kāi)發(fā)產(chǎn)物(R)-MA的高效提取與精制工藝，并在小試(7L反應(yīng)罐)水平實(shí)現(xiàn)生物法制備(R)-MA。具體內(nèi)容包括:
　　 對(duì)Saccharomyces ellipsoideus GIM2.105發(fā)酵培養(yǎng)基的組分以及發(fā)酵培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究。確定了發(fā)酵培養(yǎng)基成分:Saccharomyces ellipsoideus GIM2.105培養(yǎng)基成分:葡萄糖4%，酵母膏0.3%，(NH4)2HPO41.3%，KH2PO40.658%，N

3、aCl0.12%，ZnSO4·7H2O0.006%，MnSO4·4H2O0.0038%。確定了S.ellipsoideus的最佳罐上發(fā)酵條件為:通氣量4L/min，攪拌轉(zhuǎn)速200 r/min，發(fā)酵時(shí)間24 h。在此最適條件下，單位S.ellipsoideusGIM2.105菌體轉(zhuǎn)化苯甲酰甲酸的產(chǎn)率由40%左右提高至59%左右。微生物生物量也由初始的15 g/L提高到28 g/L。
　　 在搖瓶水平上，對(duì)S.ellipsoideu

4、s GIM2.105不對(duì)稱還原苯甲酰甲酸生成(R)-扁桃酸的條件進(jìn)行了研究，確定了最適合的反應(yīng)條件，在密閉的條件下，溫度35℃，細(xì)胞濃度為120 g/L，底物濃度為10 g/L，pH6.5，反應(yīng)時(shí)間48 h，反應(yīng)連續(xù)進(jìn)行10個(gè)批次，(R)-扁桃酸產(chǎn)率均可達(dá)到70%，e.e.值達(dá)到99%以上。在小試(7L反應(yīng)罐)水平，產(chǎn)率可以達(dá)到81%，罐上進(jìn)行3個(gè)批次反應(yīng)，產(chǎn)率都在80%左右，e.e.值達(dá)到99%以上，為還原苯甲酰甲酸生成(R)-扁桃酸