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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)在體外培養(yǎng)神經(jīng)元建立氧糖剝奪模型中的水平變化。
方法:
通過體外原代培養(yǎng)24h內(nèi)的新生SD大鼠大腦海馬神經(jīng)元,應(yīng)用免疫熒光染色及電子顯微鏡鑒定神經(jīng)元細(xì)胞,應(yīng)用體外氧糖剝奪(oxygen-glucose deprivation,OGD)建立大鼠神經(jīng)元細(xì)胞缺血缺氧損傷模型,分別對(duì)復(fù)氧1h、6h、12h、24h、48h、72
2、h的神經(jīng)元提取蛋白質(zhì),并通過Western-Blot法檢測(cè)上述不同時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)元損傷模型中NSE水平。
結(jié)果:
1.4-6h神經(jīng)元細(xì)胞基本貼壁,隨著時(shí)間增加,神經(jīng)元形態(tài)發(fā)生變化,突起增長(zhǎng)、變粗,胞體增大、飽滿,突起縱橫交錯(cuò),形成神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)。
2.通過免疫熒光染色證明所培養(yǎng)的是神經(jīng)元細(xì)胞,細(xì)胞核染色清晰,形態(tài)典型,突起走形如網(wǎng)狀。
3.NSE水平在神經(jīng)元細(xì)胞損傷后6h開始升高,24-48h達(dá)到高峰,72
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