sCD40L及17-AAG逆?zhèn)魃掀ば月殉舶┘?xì)胞對順鉑耐藥的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師( 或指導(dǎo)小組) 的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則啾躲印砸翩齲多姆二級學(xué)篙河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工

2、作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：飾痧善＼中文摘要s C D 4 0 L 及1 7 - A A G 逆轉(zhuǎn)上皮性卵巢癌細(xì)胞對順鉑耐藥的研究摘 要目的：卵巢癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，已成為首要死亡原因。由于在疾病早期，癥狀較隱匿，多數(shù)病人確診時已進(jìn)入晚期階段。且由于在I 臨床治療過程中，對化療藥物的耐藥更使

3、得卵巢癌患者預(yù)后差、死亡率高。因此，探討改善卵巢癌細(xì)胞的耐藥以及增強(qiáng)化療藥物敏感性成為亟待解決的問題。研究表明，在存在C D 4 0 表達(dá)的腫瘤細(xì)胞中，s C D 4 0 L ( 可溶性C D 4 0 配體) 可抑制細(xì)胞的增殖，具有調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞生長及誘導(dǎo)凋亡的作用。格爾德霉素衍生物1 7 ．A A G ( 1 7 ．烯丙胺基一1 7 一脫甲氧基格爾德霉素) 是一種H s p 9 0 抑制劑，有較強(qiáng)的抗腫瘤作用。1 7 ．A A G 已在

4、乳癌、白血病、前列腺癌等研究中表現(xiàn)出抗腫瘤活性，其主要通過抑制腫瘤侵襲、降低耐藥性及誘導(dǎo)凋亡而發(fā)揮作用。關(guān)于s C D 4 0 L 及1 7 ．A A G 抑制卵巢癌細(xì)胞生長的作用機(jī)制報道較少。本實驗的相關(guān)前期研究發(fā)現(xiàn)：s C D 4 0 L 及1 7 ．A A G 對卵巢癌細(xì)胞的增殖均有抑制作用，且隨藥物濃度的增加抑制率增高。s C D 4 0 L 聯(lián)合順鉑作用于S K O V 3 細(xì)胞可能通過下調(diào)s u r v i v i n m

5、R N A 、上調(diào)c a s p a s e ．3m R N A 及c a s p a s e ．9 m R N A 而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。s C D 4 0 L 聯(lián)合順鉑作用于S K O V 3 ／D D P 細(xì)胞可能通過下調(diào)M D R lm R N A 、L R P m R N A 、G S T - xm R N A 及s u r v i v i n m R N A 而逆轉(zhuǎn)耐藥。s C D 4 0 L 作用于兩種細(xì)胞，抑制作用無顯著差異。

6、1 7 - A A G 的增殖抑制作用在S K O V 3 ／D D P 細(xì)胞中明顯強(qiáng)于S K O V 3 細(xì)胞。s C D 4 0 L 及1 7 ．A A G 分別聯(lián)合順鉑作用于卵巢癌細(xì)胞后均可逆轉(zhuǎn)耐藥性。本實驗旨在檢測s C D 4 0 L 及1 7 ．A A G 作用于卵巢癌細(xì)胞后相關(guān)耐藥蛋白及凋亡抑制蛋白的表達(dá)情況、探討可能的作用機(jī)制。方法：1 M T T 法檢測不同濃度的s C D 4 0 L 、順鉑及兩者聯(lián)合應(yīng)用對卵巢癌細(xì)胞

7、S K O V 3 及S K O V 3 ／D D P 的增殖抑制作用，并計算藥物作用細(xì)胞后4 8小時的I C 5 0 值及逆轉(zhuǎn)倍數(shù)。2 W e s t e r n —b l o t 法檢測順鉑、s C D 4 0 L 及s C D 4 0 L 聯(lián)合順鉑處理卵巢癌細(xì)胞S K O V 3 及S K O V 3 ／D D P 前后細(xì)胞內(nèi)G S T - 兀，L R P ，P 5 3 ，B c l ．2及s u r v i v i n 蛋白的表