殼聚糖及其化學(xué)改性產(chǎn)物誘導(dǎo)微血管再生的研究.pdf

1、近年來，組織工程學(xué)研究取得了顯著進(jìn)展，同時也對研究未來的發(fā)展和走向提出了新的課題。移植的人工組織如何更好的與宿舍體內(nèi)環(huán)境契合、獲得良好的存活、生長和愈后效果，成為國內(nèi)外研究者關(guān)注的重點。首先，要保證移植組織在宿主體內(nèi)的存活，移植組織，尤其是大體積組織的血管化就成為必須要解決的課題。前人已有很多關(guān)于微血管發(fā)生機制的研究，為探索促進(jìn)血管化的道路提供了線索。研究表明血管的發(fā)生是一系列基因表達(dá)調(diào)控的結(jié)果，而如何激活這些基因的表達(dá)，則是組織工程要

2、做的工作?？赡馨l(fā)揮作用的信號包括化學(xué)信號、物理信號和生物學(xué)信號等等。曾有研究表明，在生物體本身的組織損傷修復(fù)過程中會產(chǎn)生直流電場，且外加的反向或增強電場，對損傷修復(fù)產(chǎn)生影響。那么，電信號對于微血管的發(fā)生是否存在影響？電荷性生物材料用于組織工程的效果又將如何？天然有機化合物殼聚糖因其良好的組織相容性及良好的生物活性受到生物材料研究工作者們的青睞，前人對殼聚糖及其不同改性產(chǎn)物的研究亦已有很多，但尚未有從電性角度對比殼聚糖及其帶不同電性的修飾

3、產(chǎn)物在組織修復(fù)中的作用的相關(guān)研究。
　　 本文采用殼聚糖及其改性修飾產(chǎn)物羧甲基殼聚糖（帶負(fù)電）及季銨化殼聚糖（帶正電）為材料，首先對三種材料進(jìn)行相關(guān)表征，并使用三種化合物制備凍干材料進(jìn)行后續(xù)研究。通過SEM掃描電鏡、孔徑及孔隙率測算等方法了解三種電性的凍干材料的三維結(jié)構(gòu)。本文使用三種化合物的凍干材料在體內(nèi)及體外進(jìn)行了MTT試驗、皮下埋植術(shù)后取材的HE染色、Masson染色等實驗，評價不同電性的三種材料的細(xì)胞相容性及對微血管形成的

4、影響。最后，本文中分別制備了VEGF結(jié)合的三種電性的凍干材料，使用該材料進(jìn)行控釋實驗及通過HE染色評價該材料對微血管生成的影響。并通過VEGF結(jié)合組的實驗結(jié)果與單純凍干材料組的實驗結(jié)果對比，對電性可能影響微血管生成的方式做初步探索。
　　 實驗結(jié)果顯示，體外進(jìn)行的細(xì)胞相容性實驗中，負(fù)電性的材料表現(xiàn)優(yōu)于其他兩種材料，而帶正電的材料表現(xiàn)最差。然而在體內(nèi)實驗中，盡管帶正電的材料的白細(xì)胞計數(shù)始終顯著高于其他兩組，但在促進(jìn)微血管形成方面，

5、它仍顯示出優(yōu)于電中性殼聚糖材料的效果。帶負(fù)電性的材料在體內(nèi)及體外實驗中都顯示出較好的細(xì)胞相容性和對微血管生成的促進(jìn)作用。VEGF結(jié)合的凍干材料的控釋中，負(fù)電性材料具有較為持久的緩釋作用，正電性材料和電中性材料呈現(xiàn)較為明顯的突釋現(xiàn)象。VEGF結(jié)合的凍干材料進(jìn)行的對血管計數(shù)結(jié)果也表現(xiàn)出與釋放曲線相符的變化趨勢。
　　 本文得出結(jié)論為負(fù)電性材料的血管化及組織再生性能最好，與VEGF的結(jié)合的能力可能是影響負(fù)電性材料對于微血管生成促進(jìn)作用