Beclin 1表達(dá)下調(diào)與肝細(xì)胞癌不良預(yù)后關(guān)系的研究.pdf

1、原發(fā)性肝細(xì)胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是威脅人類健康的主要惡性腫瘤之一，且近年又有上升趨勢。肝癌發(fā)展快、轉(zhuǎn)移早、預(yù)后差、生存期短，而傳統(tǒng)的手術(shù)、放療、化療、及中西醫(yī)結(jié)合治療的中遠(yuǎn)期療都不理想。隨著基因技術(shù)的興起和發(fā)展，人們開始嘗試從基因角度來探索肝癌診斷和治療的新途徑。 目的：研究抑癌基因Beclin 1在原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織及肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況及其在肝癌發(fā)展中的作用。探討肝癌發(fā)展的分子生

2、物學(xué)機制。為肝癌臨床治療提供新的途徑。 方法：收集中南大學(xué)湘雅醫(yī)院普外科2004年3月至2005年9月間36例手術(shù)切除的肝癌及癌旁肝組織，以及肝癌細(xì)胞系IIepG2和人肝細(xì)胞系CCL13。應(yīng)用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)來檢測Beclin 1在肝癌組織及細(xì)胞中的表達(dá)情況。并比較Beclin 1在肝癌組織中的表達(dá)量與肝癌臨床病理特征之間的關(guān)系。同時比較Beclin 1在結(jié)節(jié)性肝癌、小肝癌和孤立性大肝癌組織中的表達(dá)差

3、異。采用免疫組化法(Immunohistochemistry)檢測了Beclin 1蛋白在36例肝癌標(biāo)本中的表達(dá)情況及其在亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中的定位情況。通過臨床隨訪分析Beclin 1的表達(dá)與肝細(xì)胞癌預(yù)后的關(guān)系。 結(jié)果：肝癌患者的肝癌組織、相應(yīng)癌旁肝組織及正常肝組織中Beclin 1mRNA的表達(dá)存在差異。Beclin 1 mRNA在肝癌組織、癌旁肝組織、正常肝組織中的表達(dá)分別為0.57±0.23,0.85±0.22,0.87±0.

4、10。肝癌組織中Beclin 1mRNA的表達(dá)水平明顯低于癌旁肝組織，差異具有顯著性(P<0.05)。而Beclin1 mRNA在癌旁肝組織和正常肝組織中的表達(dá)差異不具有顯著性(P>0.05)。Beclin 1 mRNA在肝癌細(xì)胞系}tepG2表達(dá)水平為0.16±0.006，而在人肝細(xì)胞系CCL13中表達(dá)水平為0.80±0.007，結(jié)果顯示Beclin 1 mRNA在肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)低于人肝細(xì)胞系(P=0.000)。 免疫組

5、化結(jié)果顯示Beclin 1蛋白表達(dá)定位于肝癌及癌旁肝組織細(xì)胞的細(xì)胞漿中。Beclin 1蛋白在肝癌組織中的陽性表達(dá)量低于癌旁肝組織，具有顯著性差異(P<0.05)。 我們將肝癌標(biāo)本按有無包膜、有無肝硬化、腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)目、有無靜脈浸潤、腫瘤細(xì)胞分化程度等臨床病理特征進(jìn)行分組，比較Beclin 1 mRNA的表達(dá)與肝癌臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)果顯示：Beclin 1的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的分化程度、有無包膜、有無肝硬化、腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)目密切

6、相關(guān)。在靜脈浸潤組肝癌中Beclin1 mRNA的表達(dá)低于無靜脈浸潤組，但差異未達(dá)到統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。根據(jù)相關(guān)臨床資料我們將肝癌標(biāo)本分為小肝癌、孤立性大肝癌、結(jié)節(jié)性肝癌三組。小肝癌和孤立性大肝癌中Beclin 1 mRNA的表達(dá)均明顯高于結(jié)節(jié)性肝癌(P=0.04和P=0.006)，而在小肝癌和孤立性大肝癌兩組之間Beclin 1 mRNA的表達(dá)無明顯差異(P>0.05)。 36例患者，獲得隨訪病人有34例(隨訪率94

7、.44％)。將34例肝細(xì)胞癌按Beclin lmRNA的表達(dá)情況分為低表達(dá)組和高表達(dá)組，其中高表達(dá)組15例，低表達(dá)組19例。比較高表達(dá)組和低表達(dá)組復(fù)發(fā)／轉(zhuǎn)移率和生存率的差異，結(jié)果顯示Beclin 1低表達(dá)組復(fù)發(fā)／轉(zhuǎn)移率顯著高于高表達(dá)組(P=0.001)，Beclin l高表達(dá)組生存率顯著高于低表達(dá)組fP=0.029)。 結(jié)論：Beclin l在肝癌組織中表達(dá)下調(diào)對肝癌的發(fā)展起著重要作用，并與肝癌患者的預(yù)后密切相關(guān)。這些提示，B