端粒酶在阿霉素性心肌病發(fā)病機(jī)制的作用及黃芪甲甙干預(yù)的研究.pdf

1、目的:探討心肌病(Cardiomyopathy)大鼠心肌端粒酶的變化及其生物學(xué)意義。觀察黃芪甲甙(Astragaloside)對阿霉素(Adriamycin ADR)所致大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響,探討黃芪甲甙抗心肌細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制。
　　方法:SD大鼠隨機(jī)分4組,空白對照組(A組);阿霉素組(B組);阿霉素+黃芪甲甙劑量組(C組);黃芪甲甙劑量組(D組)。阿霉素組和阿霉素+黃芪甲甙組:每周一次腹腔注射阿霉素,劑量按2.5mg/kg

2、,每周按體重調(diào)整一次用藥劑量,共7周?？瞻讓φ战M和黃芪甲甙組:腹腔注射生理鹽水。阿霉素和空白對照組:喂養(yǎng)普通飼料。阿霉素+黃芪甲甙組和黃芪甲甙組:喂養(yǎng)含有黃芪甲甙的飼料。蘇木素-伊紅(Haematoxylineosin HE)染色觀察心肌損傷程度。采用缺口末端標(biāo)記法(Insitu end-labeled DNA TUNEL)檢測心肌凋亡細(xì)胞,免疫組織化學(xué)檢測端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(Telomerase reverset ranscriptase

3、 TERT)的表達(dá)。并利用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:給予一定劑量的阿霉素,大鼠表現(xiàn)為逐日萎靡,逐漸消瘦,出現(xiàn)死亡。存活大鼠肝肺淤血明顯,肝肺干/濕比重比值減小,提示出現(xiàn)肝肺水腫。心臟的重量與體重成正比,模型組大鼠體重輕,心臟的絕對值也小,但相對體重,心臟的重量較對照組明顯增加,心臟重量/體重比值變大。HE染色觀察:空白對照組心肌細(xì)胞排列整齊均勻,橫紋清楚,細(xì)胞大小均一,有少量膠原纖維。ADR組心肌細(xì)胞胞核消失,殘存的心肌胞

4、漿疏松,并可見空泡變性和顆粒變性。纖維組織增生,肌原纖維稀疏,心肌排列紊亂,心肌壞死。給與黃芪甲甙干預(yù)后,改善實驗?zāi)Ｐ徒M大鼠的生存率,肝肺淤血消失,大鼠心功能也得到改善。HE染色觀察發(fā)現(xiàn)僅見少量心肌纖維消失,心肌細(xì)胞溶解,胞核消失。細(xì)胞肥大,空泡變性,纖維組織增生不明顯。TUNEL檢測和免疫組織化學(xué)檢測發(fā)現(xiàn):與A組比較,ADR組心肌細(xì)胞細(xì)胞凋亡發(fā)生率增高,凋亡指數(shù)(Apoptosis index AI)(1.84±0.21 vs0.33

5、±0.08,p<0.01);TERT表達(dá)(0.765±0.025 vs2.832±0.054,p<0.01)下降,用黃芪甲甙干預(yù)后發(fā)現(xiàn),與ADR組比較,黃芪甲甙能降低阿霉素所致心肌細(xì)胞的凋亡指數(shù)(0.57±0.14 vs1.84±0.21,p<0.05),TERT的表達(dá)(2.194±0.028 vs0.765±0.025,p<0.05)上升。
　　結(jié)論:心肌病大鼠心肌細(xì)胞的TERT表達(dá)的下降,降低了端粒酶活性,導(dǎo)致心肌細(xì)胞增殖減少