短發(fā)夾RNA沉默血紅素氧合酶-1基因表達(dá)對胃癌細(xì)胞系SGC-7901生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：胃癌是我國最常見的消化道惡性腫瘤之一，且有上升的趨勢，嚴(yán)重危害了廣大人民群眾的健康。傳統(tǒng)的外科手術(shù)與化療均有各自的局限性，導(dǎo)致胃癌臨床治療效果不滿意，所以研究胃癌發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制及尋求臨床治療的分子靶點成為當(dāng)前人們普遍關(guān)注和迫切需要解決的問題。血紅素氧合酶—1（heme oxygenase—1，HO—1），又稱熱休克蛋白32（hot shock protein32，HSP32），是將血循環(huán)中衰老的紅細(xì)胞及血紅蛋白釋出的血紅素分

2、解為鐵離子、膽綠素（biliverdin）與一氧化碳（carbon monoxide，CO）三種產(chǎn)物的起始酶和關(guān)鍵酶。此三種產(chǎn)物是HO—1發(fā)揮抗炎、抗氧化、抗凋亡功能的主要效應(yīng)分子。本研究觀察血紅素氧合酶—1（HO—1）基因沉默對胃癌細(xì)胞系SGC—7901生長、增殖的影響。 方法：構(gòu)建靶向HO—1的短發(fā)夾RNA（shRNA—HO—1）干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞系SGC—7901，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT—PCR）、細(xì)胞免疫化學(xué)分別在

3、mRNA、蛋白質(zhì)水平檢測抑制效果。流式細(xì)胞儀和噻唑藍(lán)（MTT）檢測HO—1基因沉默后細(xì)胞的細(xì)胞周期和生長情況。實驗結(jié)果用SAS9.13統(tǒng)計軟件分析。 結(jié)果：shRNA—HO—1在mRNA、蛋白質(zhì)水平高效特異地抑制了細(xì)胞SGC—7901中HO—1的表達(dá)（抑制率分別為62.4%、67.6%）；較對照質(zhì)粒組，HO—1的表達(dá)被抑制后，G0/G1期細(xì)胞百分比明顯減少（52.025±1.638vs67.525±1.938，P<0.05），細(xì)