尖吻蝮毒液類凝血酶的序列分析和異源表達.pdf

1、安徽大學碩士學位論文尖吻蝮毒液類凝血酶的序列分析和異源表達姓名：金雛鳳申請學位級別：碩士專業(yè)：細胞生物學指導教師：查向東20070401尖吻蝮毒液類凝血酶的序列分析和異源表達由于質(zhì)量或純度不高，有時也會產(chǎn)生毒副作用。相比之下，若采用基因工程方法生產(chǎn)酶制劑，則藥物成分單一可靠，療效更為確切，無出血等毒副作用，而且可以縮短生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本。本實驗將以尖吻蝮毒液總RNA的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板所擴增出的產(chǎn)物與融合硫氧還蛋白的載體pBAD／rh

2、ioTOPO相連接，成功地在大腸桿菌中誘導表達出了目的蛋自。該表達系統(tǒng)不僅提供了基因工程生產(chǎn)類凝血酶制劑的途徑，同時也為分析各種類凝血酶結構與功能的關系提供了良好的試驗體系。目前，蛇毒類凝血酶的非融合表達尚未見成功報道。本實驗針對蛇毒類凝血酶非融合表達困難的這一現(xiàn)象，通過優(yōu)化設計重組質(zhì)粒pBV220～TLE，對其一級結構與表達的關聯(lián)特性進行了初步研究。通過尖吻蝮毒液類凝血酶的異源表達研究我們發(fā)現(xiàn)，影響類凝血酶表達的關鍵因素在于其mRNA