WAVE1、PDGFR-β在兒童急性白血病的表達及其關(guān)系探討.pdf

1、目的：白血病是我國兒童和青少年最常見的惡性疾病，揭示兒童急性白血病的發(fā)病機制，對于防治兒童白血病具有非常重要的意義。同其它惡性腫瘤一樣，兒童急性白血病的發(fā)生也是多因素參與，確定兒童急性白血病常見的致病基因，將其定位、分離，并研究其生物學(xué)功能成為兒童白血病研究中極其重要的方面。WAVEl(WASP-familyverprolinhomologousproteinl)為近年來發(fā)現(xiàn)的新型肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白，在肌動蛋白聚合和細胞骨架重排中發(fā)揮重要

2、作用。近年研究發(fā)現(xiàn)WAVE1在人類血液系統(tǒng)腫瘤細胞株中高表達。前期課題已經(jīng)發(fā)現(xiàn)WAVE1在兒童急性白血病患兒BMMCs中高表達，并發(fā)現(xiàn)WAVE1與耐藥及抗凋亡作用密切相關(guān)，但其與白血病作用機制尚未完全明確。本實驗檢測WAVEl和PDGFR-β在兒童急性白血病患者及HL-60、Raji細胞中的表達，探討WAVE1和PDGFR-β與白血病的關(guān)系，并研究二者之間是否存在調(diào)控關(guān)系。
　　 方法：收集急性白血病患者骨髓標本，根據(jù)病程分為初

3、治組、復(fù)發(fā)組、緩解組，同時收集同期貧血查因患者骨髓標本為對照組，提取骨髓單個核細胞，RT-PCR方法檢測WAVE1和PDGFR-p在mRNA水平的表達；培養(yǎng)HL-60、Raji細胞，分為轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-WAVEl組（轉(zhuǎn)染組）和轉(zhuǎn)染pcDNA3.1空載體組（對照組），轉(zhuǎn)染W(wǎng)AVElsiRNA組（干擾組）和轉(zhuǎn)染空干擾載體組（對照組），轉(zhuǎn)染48小時后收取細胞提取RNA和蛋白，分別以RT-PCR、WestemBlot方法在mRNA、蛋白水

4、平檢測WAVE1和PDGFR-β表達。
　　 結(jié)果：1.在急淋和急非淋中，與緩解組和對照組比較，初治組和復(fù)發(fā)組的WAVEl和PDGFR-p表達均顯著增高(P<0.05)；初治組和復(fù)發(fā)組比較及緩解組和對照組比較，WAVEl和PDGFR-β的表達無差異(P>0.05)。
　　 2.在mRNA水平，HL-60細胞、Raji細胞干擾組WAVEl表達明顯降低，而PDGFRβ表達分別為對照組的182％及141％；轉(zhuǎn)染組WAVE1相對

5、于對照組增加40％、55％，而PDGFRβ表達分別為對照組的54％、65％。
　　 3.在蛋白水平，HL-60細胞、Raji細胞內(nèi)干擾組WAVE1表達明顯降低，而PDGFRβ表達分別為對照組的157％及146％;轉(zhuǎn)染組WAVE1相對于對照組增加45％、54％，而PDGFRI3表達分別為對照組的59％、60％。
　　 結(jié)論：1.WAVE1和PDGFR-β在急性白血病的初治組、復(fù)發(fā)組高表達，緩解組低表達，并與病程相關(guān)。