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1、目的:本實(shí)驗(yàn)用血清藥理學(xué)方法研究生芪復(fù)方中藥在體外實(shí)驗(yàn)中對(duì)葡萄糖消耗的影響并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討。
方法:1.選用與胰島β細(xì)胞功能相似的INS--1細(xì)胞株,設(shè)溶媒對(duì)照組、生芪復(fù)方中藥處理組、格列齊特陽(yáng)性對(duì)照組,酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組在不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基中胰島素釋放情況。2.選用國(guó)際通用脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化方案誘導(dǎo)3T3-L1脂肪前體細(xì)胞為成熟脂肪細(xì)胞,油紅0染色鑒定,地塞米松誘導(dǎo)胰島素抵抗模型,設(shè)溶媒對(duì)照組、模型組、生芪
2、復(fù)方中藥處理組、羅格列酮陽(yáng)性對(duì)照組,葡萄糖氧化酶法檢測(cè)葡萄糖消耗量,四甲基偶氨唑鹽(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞活力并對(duì)葡萄糖消耗量進(jìn)行標(biāo)化,逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PT-PCR)測(cè)定葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4(GLUT4)mRNA含量。3.選用人源肝癌HepG2細(xì)胞株,同時(shí)采用高胰島素誘發(fā)HepG2細(xì)胞建立胰島素抵抗模型,設(shè)溶媒對(duì)照組、模型組、生芪復(fù)方中藥處理組、羅格列酮陽(yáng)性對(duì)照組,葡萄糖氧化酶法檢測(cè)葡萄糖消耗量,MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力并對(duì)葡萄糖消耗量進(jìn)
3、行標(biāo)化,PT-PCR法測(cè)定葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體2(GLUT2)mRNA含量。
結(jié)果:1.在不同濃度葡萄糖培養(yǎng)基中各劑量生芪復(fù)方中藥與相應(yīng)濃度的溶媒對(duì)照組比較促INS--1細(xì)胞胰島素釋放作用均無(wú)顯著差異(P均>0.05),而格列齊特各劑量均較相應(yīng)濃度的其他兩組有顯著促分泌作用(P均<0.05)。2.生芪復(fù)方中藥處理組3T3-L1葡萄糖消耗明顯高于模型組(P均<0.05),與羅格列酮組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05),降糖作用呈濃度依
4、賴性,并且隨培液中葡萄糖濃度的升高而呈降低趨勢(shì),同時(shí)生芪復(fù)方中藥處理組與羅格列酮組GLUT4mRNA均明顯高于模型組(P均<0.05)。3.生芪復(fù)方中藥處理組HepG2葡萄糖消耗明顯高于模型組(P均<0.05),與羅格列酮組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05),降糖作用呈濃度依賴性,并且隨培液中葡萄糖濃度的升高而呈降低趨勢(shì),同時(shí)生芪復(fù)方中藥處理組與羅格列酮組GLUT2mRNA均明顯高于模型組(P均<0.05)。
結(jié)論:生芪復(fù)方
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