亞低溫對顱腦創(chuàng)傷大鼠PTEN表達的影響.pdf

1、目的:亞低溫通過多條信號途徑參與顱腦創(chuàng)傷后神經(jīng)元保護作用,而PTEN是一個在腦組織中高度表達的具有促進損傷后神經(jīng)細胞凋亡作用的抑癌基因,其通過磷酸化作用,調(diào)控多種的細胞間信號傳導,促進細胞凋亡。兩者在調(diào)控細胞凋亡過程中有許多共同的作用因子,因此推測亞低溫對顱腦創(chuàng)傷后神經(jīng)細胞凋亡的保護作用可能與影響 PTEN表達有關,本課題通過研究亞低溫對顱腦創(chuàng)傷后PTEN表達的影響,闡明亞低溫抑制神經(jīng)元凋亡與PTEN的關系,為亞低溫的臨床實施提供更多的

2、理論依據(jù)。
　　方法:1.以 SD雄性大鼠為研究對象,采用Marmarou方法制作大鼠顱腦損傷動物模型,隨機分為3組:①對照組只麻醉及切開頭皮不致傷;②常溫 DAI組致傷后,使用保溫毯使其體溫維持在36～37℃;③亞低溫 DAI組致傷后,采用物理降溫方法其體溫降至32～35℃;2.根據(jù)大鼠受傷后生命體征變化及行為判斷造模是否成功;3.HE染色檢測亞低溫對損傷后神經(jīng)細胞的保護作用;4.RT-PCR及WEstErn blot檢測大鼠D

3、AI后神經(jīng)細胞表達 PTEN的變化,及亞低溫對大鼠DAI后神經(jīng)細胞表達 PTEN的影響。
　　結果:1.成功復制Marmarou大鼠顱腦損傷動物模型;
　　2.HE染色表明:對照組腦組織結構完整,神經(jīng)細胞形態(tài)正常;常溫創(chuàng)傷組腦組織廣泛水腫及神經(jīng)元變性壞死改變,視野內(nèi)可見有核溶解及神經(jīng)元細胞空泡樣變,神經(jīng)元存活數(shù)目明顯減少,細胞間隙顯著增寬;亞低溫組腦組織病理改變明顯較常溫組輕,可見部分神經(jīng)細胞變性,但深染程度減輕,細胞無縮小

4、,細胞周間隙無明顯變化,水腫較常溫創(chuàng)傷組輕
　　3.RT-PCR顯示創(chuàng)傷后 PTENmRNA的表達在傷后6小時已經(jīng)開始增加,24小時達到高峰,72小時后仍高于對照組,亞低溫可以明顯較降低經(jīng)創(chuàng)傷后PTENmRNA的表達水平。
　　4.通過 WEstErn blot檢測到創(chuàng)傷后神經(jīng)細胞中PTEN蛋白的濃度在傷后6小時已經(jīng)開始增加,24小時達到高峰,72小時后仍高于對照組,亞低溫可以明顯較降低經(jīng)創(chuàng)傷后6小時、24小時 PTEN蛋白