促胰島β細胞增殖中藥的篩選和藥效評價.pdf

1、糖尿病(diabetes mellitus，DM)是由多種遺傳和環(huán)境因素相互作用而引起的一組慢性代謝異常綜合征。目前常用的口服降糖藥有雙胍類、磺脲類、噻磋烷二酮類等。這些化學降糖類藥物盡管見效較快，但對肝、腎等臟器損害較大，甚至有發(fā)生低血糖的危險。一般這類抗高血糖藥物儀儀只是降低異常升高的血糖，對于糖尿病患者起到治標不治本的作用。為此，本課題著眼于其病理基礎(chǔ)之一“胰島損傷”，特別是晚期糖尿病，胰島細胞功能嚴重衰退，B細胞大量凋亡。針對這

2、一點本課題建立了一個細胞水平上的藥物篩選模型，從我國傳統(tǒng)中藥庫中篩選出具有促進β細胞增殖，抑制其凋亡的藥物。從而達到治標又治本的目的。且純天然提取物類藥物具有作用溫和、毒副作用小等優(yōu)點，開發(fā)利用潛力很大。首先，本論文以大鼠胰島瘤細胞系RINm5f為基礎(chǔ)材料，以GLP-1為陽性參照，用SRB法測定細胞生長曲線及增殖活性。確定了最佳細胞鋪板濃度為10000個/孔，陽性參照濃度50nmol/L，增殖率最高達30％。確定了中藥樣品的篩選濃度分別

3、為100mg/L和10mg/L，最佳干預時間72h，成功建立了體外藥物篩選模型。并運用此模型對313味中藥進行了初篩和復篩，篩選出蜈蚣、地龍兩味中藥具有促RINm5f細胞增殖的作用。然后，我們對活性藥物進行初步分離。動物類藥材蜈蚣，地龍采用水提醇沉方法，然后分別對各分離組分進行細胞活性評價。結(jié)果顯示只有蜈蚣的50％乙醇醇沉上清組分對RINm5f細胞的生長有顯著的促進作用，其他各組分都無顯著促增殖活性的作用。最后，本論文選擇促細胞增殖率相