甲狀腺激素對大鼠額葉SNAP-25及乙酰膽堿的影響.pdf

1、目的：研究成年期甲狀腺功能減退癥(簡稱甲減)大鼠前額葉內(nèi)突觸小體相關(guān)蛋白-25(SNAP-25)的表達(dá)情況和乙酰膽堿變化,給予甲狀腺素替代治療后是否能使改變的蛋白水平及乙酰膽堿含量恢復(fù)正常。
　　方法：普通級健康3月齡成年Sprague-Dawley雄性大鼠隨機(jī)分為:(1)甲減組大鼠每日飲用含0.05％PTU的自來水4周,第五周起開始飲用自來水,共6周;(2)常規(guī)劑量替代治療組(T4-6)大鼠每日飲用含0.05%PTU的自來水4周

2、,第5周起開始腹腔注射左旋T4(L-T4)6μg/(kg·d),共6周;(3)大劑量替代治療組(T4-8)大鼠每日飲用含0.05%PTU的自來水4周,第5周起開始腹腔注射左旋T4(L-T4)8μg/(kg·d),共6周;(4)正常對照組大鼠6周均每日飲用自來水。本實(shí)驗(yàn)研究遵循“實(shí)驗(yàn)用動物管理和使用指南”。待造模6周結(jié)束后,于腹主動脈取血,冰上分離腦組織,應(yīng)用放射免疫法檢測大鼠血清T3、T4、TSH水平,超敏S-P法行免疫組織化學(xué)檢測,J

3、D-801形態(tài)學(xué)生物圖像分析系統(tǒng)對前額葉Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ層的 SNAP-25的免疫反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行光密度值分析,以平均光密度(average optical density,AOD)作為觀察指標(biāo)。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(x±S)表示,并運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件采用單因素方差分析(ANOVA),P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：1.激素水平甲減組大鼠與正常對照組相比,血清 T3、T4水平顯著減低,TSH明顯增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意

4、義;常規(guī)劑量替代治療后,血清T3、T4、TSH恢復(fù)至正常水平,差異無統(tǒng)計學(xué)意義;大劑量甲狀腺素替代治療后血清T3、T4高于正常對照組,TSH低于正常,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.量化分析四組大鼠額葉分子層、外顆粒層、外椎體細(xì)胞層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)椎體細(xì)胞層SNAP-25免疫反應(yīng)產(chǎn)物的AOD值(見表2):與正常對照組相比,甲減組大鼠額葉各層 SNAP-25免疫反應(yīng)產(chǎn)物AOD值均增多,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義;T4-6(常規(guī)劑量)組SNAP-25 AOD值

5、與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義;與甲減組比較,T4-8(大劑量)組SNAP-25的免疫反應(yīng)產(chǎn)物在各層的AOD值差異有統(tǒng)計學(xué)意義。3.甲減組與正常對照組相比,大鼠額葉內(nèi)乙酰膽堿含量減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。替代治療后乙酰膽堿含量恢復(fù)致正常水平,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論:(1)成年期甲減大鼠額葉SNAP-25蛋白表達(dá)增多,乙酰膽堿含量減少。(2)常規(guī)劑量及大劑量替代治療后均能使該蛋白表達(dá)水平恢復(fù),大劑量替代治療后SNAP-25表達(dá)