蘆薈提取物對(duì)肛腸疾病創(chuàng)面愈合的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:1、觀察不同濃度的蘆薈提取物對(duì)內(nèi)毒素刺激的成纖維細(xì)胞增殖的影響；2、探討蘆薈提取物對(duì)大鼠直腸損傷模型的治療作用及其機(jī)制，為臨床應(yīng)用蘆薈提取物治療促進(jìn)肛門部疾病術(shù)后創(chuàng)面愈合提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 實(shí)驗(yàn)Ⅰ．觀察不同濃度的蘆薈提取物對(duì)內(nèi)毒素刺激的成纖維細(xì)胞增殖的影響：實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分成對(duì)照組、LPS刺激組、給藥組，其中給藥組：用不同濃度(0．5 g/ml、0．25g/ml、0．1g/ml)的蘆薈提取物分別作用

2、于內(nèi)毒素(LPS)刺激12小時(shí)的L929小鼠成纖維細(xì)胞株24小時(shí)，通過(guò)MTT(四氮甲唑藍(lán))法檢測(cè)蘆薈提取物對(duì)內(nèi)毒素(LPS)刺激的成纖維細(xì)胞增殖的影響；應(yīng)用熒光倒置顯微鏡(德國(guó)萊卡)觀察各組細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變；
　　 實(shí)驗(yàn)蘆薈提取物對(duì)大鼠直腸損傷模型治療作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究：動(dòng)物模型制備于玻璃棒一側(cè)頭端包裹細(xì)砂紙并固定，包裹后的棒端直徑約1cm，將該棒緩插入大鼠肛門內(nèi)約3cm，反復(fù)旋轉(zhuǎn)磨擦，造成局部粘膜層損傷、出血。按付小兵等[

3、1]方法要求，隨即于組織損傷處(距肛門3cm處)取對(duì)稱兩點(diǎn)各注入培養(yǎng)基菌液0．25ml，使之創(chuàng)面感染。2．取健康wistar大鼠30只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、蘆薈提取物治療組。蘆薈提取物治療組在造模后8小時(shí)，連續(xù)治療7天后，取各組大鼠直腸組織行蛋白質(zhì)含量(考馬斯亮藍(lán)法)、髓過(guò)氧化物酶(MPO)、成纖維細(xì)胞數(shù)測(cè)定，以及組織學(xué)檢查。
　　 結(jié)果：
　　 實(shí)驗(yàn)Ⅰ：與對(duì)照組比，LPS刺激組形態(tài)學(xué)觀察有明顯改變，LPS顯著抑

4、制成纖維細(xì)胞的增殖(P<0．001)，鏡下表現(xiàn)為細(xì)胞稀疏，生長(zhǎng)減慢，細(xì)胞形態(tài)拉長(zhǎng)；與LPS刺激組比，加入不同濃度(0．5 g/ml、0．25g/ml、0．1g/ml)的蘆薈提取物后，可以不同程度地減輕LPS的抑制作用，成纖維細(xì)胞的增殖恢復(fù)，各組形態(tài)學(xué)觀察也有相應(yīng)程度的改變，其中以大劑量組最為明顯(P<0．01)，并且呈現(xiàn)劑量依賴性，光學(xué)顯微鏡鏡下表現(xiàn)為細(xì)胞生長(zhǎng)恢復(fù)，基本融合成片，呈梭形生長(zhǎng)。
　　 實(shí)驗(yàn)Ⅱ：與正常對(duì)照組、模型組比

5、，蘆薈提取物治療組：腸組織蛋白質(zhì)含量測(cè)定(20．23±6．45μg/mg))，MPO測(cè)定(0．98±0．22 u/g)，腸組織成纖維細(xì)胞數(shù)測(cè)定(48．9±9．2個(gè)/視野)，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．01)。與正常對(duì)照組、模型組比，蘆薈提取物治療組：H E染色，腸病理組織學(xué)檢查上皮基本完整，漿膜層基本正常。
　　 結(jié)論：內(nèi)毒素(LPS)可以顯著抑制體外成纖維細(xì)胞的增殖，鏡下表現(xiàn)為細(xì)胞稀疏，生長(zhǎng)減慢，細(xì)胞形態(tài)拉長(zhǎng)。蘆薈提取物對(duì)LPS刺