鉤藤提取物對實驗性高血壓小鼠降壓作用的實驗研究.pdf

1、目的：研究鉤藤及其提取物對正常動物及高血壓模型動物血壓的影響，以藥理實驗結(jié)合高效液相色譜法篩選鉤藤降血壓有效部位。通過觀察鉤藤各提取物對實驗性內(nèi)分泌型高血壓動物的降壓作用，并選用不同層次的多項實驗指標(biāo)探討其降壓機理。為臨床防治高血壓病及尋找鉤藤降血壓新化合物及開發(fā)降壓新藥提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.以Wistar大鼠及KM小鼠為研究對象，通過皮下注射丙酸睪酮復(fù)制并比較高血壓動物模型。丙酸睪酮劑量為：大鼠劑量為

2、5mg/kg，小鼠劑量為0.22mg/kg，連續(xù)14天。觀察動物的一般行為學(xué)和體重變化，測量各組動物的血壓和心率，并測定血清TC、TG指標(biāo)。
　　 2.將鉤藤藥材用不同濃度的甲醇提取后，進一步分離得到鉤藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。對乙酸乙酯部位進行分離，共得20個流份。對Fr3、Fr7流分進一步分離純化得6個結(jié)晶。使用HPLC法對鉤藤及其提取物進行成分分析。
　　 3.將高血壓實驗動物隨機分為10組，陽性對照組給

3、予2.16mg·kg-1·d-1的卡托普利混懸液，鉤藤各實驗組的給藥劑量均為90g(生藥)/kg。模型對照組灌胃給予同量雙蒸水，連續(xù)12天。分別測定各組給藥前及給藥后30，60，120，240，480 min以及24h的收縮壓和心率。在實驗過程中同時觀察各組一般行為學(xué)情況，同時在實驗開始前、第3天、第6天后、第9天和第12天后測量各組體重值、血壓和心率值。
　　 4.實驗后尾靜脈取血測定血清TC、TG、HDL-C、ALT、AST

4、、SOD、MDA、CRE、BUN的水平，并測定臟器系數(shù)。
　　 5.將正常小鼠分別給與鉤藤各提取物，禁食18h后，空白組小鼠灌胃2g/Kg的葡萄糖溶液，鉤藤給提取物分別按90g/Kg生藥劑量及2g/Kg的葡萄糖。在灌胃前(0min)及灌胃30、60、120min后進行尾靜脈取血，測定血糖值。
　　 結(jié)果：
　　 1.丙酸睪酮能引起實驗動物一般行為學(xué)異常，體重增加緩慢。造模2周后，小鼠模型組血壓升高達(30.2±7

5、.88mmHg)，其心率亦有升高。同時模型組血清TC和TG較空白組明顯升高(P＜0.01)。
　　 2.鉤藤45、90mg劑量組均可以顯著降低正常小鼠血壓(P＜0.05)，其中以90 mg組收縮壓下降最為明顯。鉤藤90 mg劑量組在給藥120min后可以明顯減緩小鼠心率(P＜0.05)。鉤藤總提物組、鉤藤乙酸乙酯部位組經(jīng)12天治療后，小鼠的精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，打斗較少，毛發(fā)逐漸恢復(fù)光澤。對小鼠體重進行稱量，各給藥組與高血壓模型組比較無

6、顯著差異(P＞0.05)。鉤藤總提物，乙酸乙酯部位于給藥后1～12天內(nèi)，對內(nèi)分泌性高血壓小鼠均有明顯降低SBP和減慢HR的作用，其降壓作用隨給藥次數(shù)的增加而增強。
　　 3.長期給藥后，鉤藤提取物能持續(xù)降低血壓，改善因造模引起的一般行為學(xué)及體重的異常。對血清指標(biāo)水平亦有明顯改善。由實驗結(jié)果可知，鉤藤總提物及乙酸乙酯部位提能降低血清丙二醛(MDA)水平，同時能升超氧化岐化酶(SOD)活性。
　　 結(jié)論：
　　 1.

7、通過皮下注射丙酸睪酮復(fù)制高血壓小鼠模型，經(jīng)濟實用簡便，模型重復(fù)性、穩(wěn)定性較好，該模型進行降壓實驗是可行的。
　　 2.鉤藤及其提取物無論對正常小鼠還是高血壓小鼠均具有明顯的降壓作用，其特點是先降壓，后升壓，之后在持續(xù)降壓，降壓作用溫和而持久，并在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)的藥物量-效關(guān)系。同時對心率亦有一定的減慢作用，
　　 3.長期給藥后，鉤藤總提物組、乙酸乙酯部位能持續(xù)降低血壓，并能改善因造模引起的一般行為學(xué)及體重的異常。