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1、目的:研究石榴皮提取物(POM)對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃損傷的作用,并初探其作用機(jī)制。 方法:(1)采用丙酮提取和乙酸乙酯萃取法獲得呈灰褐色粉末狀POM,應(yīng)用絡(luò)合滴定法檢測(cè)其中單寧含量。(2)建立水浸應(yīng)激性、乙醇損傷性以及幽門結(jié)扎型胃潰瘍模型,分別觀察POM對(duì)這三種發(fā)病機(jī)理各不相同的實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍的作用。(3)檢測(cè)預(yù)先灌胃給予的POM對(duì)幽門結(jié)扎大鼠胃分泌的影響。(4)建立大鼠乙醇性胃粘膜損傷模型,從病理形態(tài)學(xué)進(jìn)一步觀察POM對(duì)乙醇致大鼠胃粘膜損
2、傷的保護(hù)作用,并檢測(cè)各組大鼠胃粘膜組織內(nèi)的一氧化氮(NO)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活力,探討POM防治乙醇性胃粘膜損傷的相關(guān)作用因素。(5)采用放射免疫方法研究了POM對(duì)幽門結(jié)扎所致胃損傷大鼠胃粘膜前列腺素(PGE2)及6-酮一前列腺素Fla(6-keto-PGF1α)含量的影響。(6)利用免疫組織化學(xué)染色法,分析POM對(duì)大鼠乙醇損傷性胃粘膜組織內(nèi)的神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nN
3、OS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)以及內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)表達(dá)的影響,探討POM對(duì)NO的調(diào)控機(jī)制。(7)通過(guò)急性毒性實(shí)驗(yàn)初步觀察POM的急性毒性反應(yīng)。 結(jié)果:(1)POM得率為10.26%,其中單寧含量為73%。(2)POM灌胃(ig)給予呈劑量依賴性明顯抑制水拘禁應(yīng)激性小鼠胃潰瘍及大鼠幽門結(jié)扎型胃潰瘍的形成和無(wú)水乙醇致胃粘膜損傷的發(fā)生。其中,高劑量POM(500mg/kg)的作用強(qiáng)度與陽(yáng)性對(duì)照藥膠態(tài)次枸櫞酸鉍
4、鉀(CBS)(100mg/kg)相比,其作用強(qiáng)度無(wú)明顯差異而優(yōu)于臨床用量的西米替?。–im)(100mg/kg)。(3)POM灌胃給藥能促進(jìn)胃黏液的分泌,但對(duì)胃液分泌、游離酸度、總酸度和總酸排出量及胃蛋白酶活性無(wú)明顯影響。(4)預(yù)先給予POM能顯著阻遏無(wú)水乙醇引起的胃粘膜組織內(nèi)NO水平下降和MDA生成增加,且能抑制胃粘膜GSH-PX和SOD活力下降。(5)POM能提高幽門結(jié)扎所致胃損傷大鼠胃粘膜前列腺素(PGE2)及6-酮一前列腺素F1
5、α(6-keto-PGF1α)的水平。(6)無(wú)水乙醇灌胃能引起大鼠胃粘膜組織內(nèi)nNOS和eNOS的表達(dá)下降,以及iNOS的表達(dá)升高,而預(yù)先給予的POM則明顯阻遏上述變化發(fā)生。(7)通過(guò)急性毒性實(shí)驗(yàn)觀察POM的LD50為8469.28 mg/kg,其95%可信限值為7252.70~9685.83mg/kg。 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:(1)POM中主要成分為單寧。(2)POM是有效的實(shí)驗(yàn)性胃損傷治療藥物,其作用可能與其所含的單寧有關(guān)。
6、(3)POM可能通過(guò)直接的局部作用防治GU。(4)POM抗實(shí)驗(yàn)性胃損傷的作用機(jī)制可能與下列因素有關(guān):①促進(jìn)胃粘液分泌;②減少自由基生成、促進(jìn)氧自由基清除以及抗脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng);③提高胃粘膜前列腺素(PGE2)及6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的水平。④阻遏胃粘膜cNOS(nNOS和eNOS)的表達(dá)下降以及抑制iNOS的過(guò)表達(dá),調(diào)控NO含量在正常水平。但其作用機(jī)制與胃液分泌、游離酸度、總酸度和總酸排出量及胃蛋白酶活性無(wú)明顯
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