補體C5a及其受體拮抗劑在阿爾茨海默病小膠質細胞病變模型中的作用.pdf

1、南方醫(yī)科大學2010級碩士學位論文補體C5a及其受體拮抗劑在阿爾茨海默病小膠質細胞病變模型中的作用TheeffectofC5aandC5areceptorantagonistonthepathologicalchangesofMicroglialcellsinAlzheimer’Sdisease課題來源：廣州市科技計劃項目基金(2010Y1一C101)學位申請人楊帆導師專業(yè)培養(yǎng)培養(yǎng)所在姓名徐書雯名稱神經病學類型學術型層次碩士研究生學院第

2、二臨床學院2013年3月18日廣州摘要雜的炎性損傷網絡，引起一系列炎癥反應，最終導致神經細胞凋亡，補體系統(tǒng)介導的損害是AB細胞毒性作用機制中的重要環(huán)節(jié)之一，A13與經典補體激活通路的Clq發(fā)生特異性結合，Clq經AB的激活而活化，活化的C1q隨之活化C3、C4、C5因子，并使補體裂解生成多種生物活性片段，包括C3a、C4a、C5a，最終形成膜攻擊復合物(MAC，C5b9復合體)，具有神經毒性的MAC可直接溶解神經元，在AD腦內造成神經元

3、凋亡。其中，補體系統(tǒng)的C5a在AD致病過程中的作用不詳，最近研究發(fā)現，在C3基因敲除(C3／)小鼠中，IgG免疫復合物依然能夠對小鼠產生C5a依賴的急性肺損傷，且損傷強度與野生型小鼠(C3／)的作用相當，這說明C5a的產生可以是非C3依賴性的，這是一條嶄新的補體激活途徑，同時提示，C5a的產生同樣會產生類似補體系統(tǒng)經傳統(tǒng)途徑激活后所導致的炎癥損傷作用。C5a可吸引表達C5a受體的小膠質細胞和星形膠質細胞向活化部位聚集，然后與A13發(fā)揮協(xié)

4、同作用，刺激膠質細胞產生細胞因子、趨化因子、黏附分子等，也可直接與小膠質細胞結合誘發(fā)氧化應激反應，導致鄰近的神經細胞損傷或死亡。因此，本研究將驗證補體C5a對AD小膠質細胞激活、炎性介質釋放的可能作用及其機制，并進一步明確C5a受體拮抗劑PMX205對上述病變過程的干預作用?！灸康摹拷B142寡聚體和纖維體的制備及其鑒定方法，利用AB卜42寡聚體刺激小膠質細胞建立阿爾茨海默病(AD)小膠質細胞病變模型：在此基礎上，探討補體C5a對A

5、D小膠質細胞模型釋放炎性因子的作用及其機制，明確C5a受體拮抗劑對上述病變過程的干預作用?！静牧虾头椒ā?材料：小鼠BV2小膠質細胞株購白武漢大學的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，澳洲胎牛血清(GIBCO)，DMEM／F12高糖培養(yǎng)基(GIBCO)，胰酶(含EDTA，025％，吉泰生化公司)，人工合成的生物晶體A13142(ENZ0公司)，六氟異丙醇(HFIPSigma)，二甲基亞砜(DMSO，MPBiomedicats)，補體C5a(HBTⅡ