朊病毒病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦組織神經(jīng)病理、神經(jīng)蛋白變化和去糖基化PrP蛋白體外誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用的研究.pdf

1、朊病毒病是一組累及人和動(dòng)物的傳染性神經(jīng)退行性疾病，隨著瘋牛病和人類變異性克雅氏病(vCJD)的出現(xiàn)，該類疾病對(duì)公共衛(wèi)生和人類健康的威脅日益顯著。其致病因子目前認(rèn)為是一種無核酸的傳染性蛋白顆粒。　　為了探討在羊瘙癢因子263K毒株感染金黃地鼠腦組織中星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元的數(shù)量及功能改變，利用免疫印跡、免疫組化方法研究了膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)和神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)在感染金黃地鼠各腦區(qū)中表達(dá)變化的特點(diǎn)。　　分析感染終末期腦

2、組織PrP蛋白糖基化比率變化發(fā)現(xiàn)，與相同日齡的金黃地鼠相比，雙糖基化修飾的PrP分子比例在三種感染途徑組中均顯著降低(P＜0.01)，而單糖基化和無糖基化PrP分子比率增高。其中單糖基化修飾PrP比例在心內(nèi)注射組和肌肉注射組中增高明顯(P＜0.01)，顱內(nèi)注射組也有增高趨勢(shì)(P=0.048＜0.05)；無糖基化修飾的PrP比例在顱內(nèi)注射組和肌肉注射組中增高顯著(P＜0.01)，在心內(nèi)注射組中略有增高?！　?duì)感染終末期動(dòng)物的神經(jīng)病理學(xué)進(jìn)

3、行觀測(cè)，發(fā)現(xiàn)在腦組織中存在大量的神經(jīng)細(xì)胞丟失以及核固縮現(xiàn)象，小腦、海馬和大腦皮質(zhì)的NSE陽性細(xì)胞數(shù)量明顯減少。為了了解在神經(jīng)元丟失過程中是否存在細(xì)胞凋亡現(xiàn)象，利用TUNEL檢測(cè)試劑盒對(duì)感染動(dòng)物和相同日齡的正常動(dòng)物腦組織進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在感染終末期金黃地鼠的大腦皮質(zhì)中有棕黃色陽性染色顆粒沉積?！　榱肆私怆玫鞍滋腔嚷矢淖?，特別是去N-糖基化PrP對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，本文從健康人外周血白細(xì)胞總DNA中克隆得到人朊蛋白基因PRNP，并通