c17.2神經(jīng)干細(xì)胞的質(zhì)膜蛋白質(zhì)組及其糖基化修飾研究

1、湖南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文C17.2神經(jīng)干細(xì)胞的質(zhì)膜蛋白質(zhì)組及其糖基化修飾研究姓名：宋琴申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳平20100501表面的天線，成為細(xì)胞相互識(shí)別、粘著、信號(hào)接收、通訊聯(lián)絡(luò)、免疫應(yīng)答等的分子基礎(chǔ)，已知的多種疾病標(biāo)志性分子和重要的抗體分子都是膜糖蛋白。目前通過(guò)富集質(zhì)膜的方法結(jié)合質(zhì)譜及數(shù)據(jù)庫(kù)搜尋得到的多為一些豐度較高的蛋白質(zhì)，細(xì)胞表面糖基化蛋白這樣的低豐度蛋白則較少得到可靠鑒定。因此，從復(fù)雜的生物樣

2、品體系中富集糖蛋白／糖肽是蛋白質(zhì)糖基化研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。本文中，運(yùn)用細(xì)胞表面蛋白捕獲技術(shù)( C e l lS u r f a c eC a p t u r i n g ，C S C —t e c h n o l o g y ) 對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞表面糖蛋白進(jìn)行富集和鑒定。利用此方法共鑒定到了非冗余糖肽有1 8 8 條，對(duì)應(yīng)于9 9 個(gè)糖基化修飾蛋白質(zhì)及2 0 0 個(gè)糖基化位點(diǎn)，其中有7 0 ％的糖基化位點(diǎn)，包括N e u r a l c e

3、l l a d h e s i o n m o l e c u l e L 1 、E p hr e c e p t o r 、N e u r o p i l i n - 1 等等一些與神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化及神經(jīng)疾病修復(fù)密切相關(guān)蛋白質(zhì)的糖基化位點(diǎn)，為本實(shí)驗(yàn)鑒定確認(rèn)的新的糖基化位點(diǎn)。很多低豐度的受體蛋白及C D 分子蛋白如I n t e r l e u k i n - 6r e c e p t o r ， L y s o p h o s p

4、h a t i d i c a c i dr e c e p t o r4 ，C D 2 7 6 ，C D 9 8 等等均得到鑒定。本工作首次構(gòu)建C 1 7 ．2 神經(jīng)干細(xì)胞的膜糖蛋白數(shù)據(jù)，得到了許多與神經(jīng)干細(xì)胞增殖與分化以及退行性疾病修復(fù)相關(guān)的蛋白質(zhì)，細(xì)胞表面糖蛋白的鑒定對(duì)于神經(jīng)干細(xì)胞在這些方向的研究提供了重要信息；鑒定到了2 6 個(gè)C D 分子，有助于發(fā)現(xiàn)新的神經(jīng)干細(xì)胞表面標(biāo)志物；并且，在這9 9 個(gè)糖蛋白中，僅有2 8 個(gè)蛋白質(zhì)與