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1、目的:本課題旨在觀察復(fù)方中藥消渴通痹顆粒對(duì)DM大鼠周圍神經(jīng)缺血狀態(tài)新生血管的影響。
方法:取清潔級(jí)SD大鼠60只,雌雄數(shù)量各一半。先適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,采用STZ腹腔注射法制造糖尿病大鼠模型,凡血糖≥16.7mmol/L 均可納入本次試驗(yàn)?zāi)P汀K刑悄虿〕赡4笫缶?%戊巴比妥鈉60mg/kg 腹腔注射麻醉,切開左股內(nèi)側(cè)皮膚,分離股動(dòng)靜脈,在坐骨神經(jīng)分三叉處,用絲線永久結(jié)扎股動(dòng)靜脈,縫合切口,制成單側(cè)肢體缺血模型。取成模大鼠4
2、0只,以血糖值的大小隨機(jī)分為模型組、消渴通痹顆粒大劑量組、消渴通痹顆粒小劑量組以及西洛他唑?qū)φ战M共4組,另設(shè)10只大鼠作為正常對(duì)照組。治療:待造模穩(wěn)定后5天時(shí)進(jìn)行治療。正常組及模型組:生理鹽水10ml/kg灌胃,每日1次。消渴通痹顆粒大劑量組1.875g/kg、消渴通痹顆粒小劑量組0.625g/kg灌胃,每天一次。西洛他唑組45mg/kg 灌胃,每天一次。每2周需要根據(jù)體重變化情況調(diào)整用藥。灌胃8周后處死大鼠,用免疫組化法測(cè)定單側(cè)缺血肢
3、體坐骨神經(jīng)新生微血管面密度(MVD)數(shù)值,檢測(cè)缺血肢體坐骨神經(jīng)血管內(nèi)皮細(xì)胞上CD34的表達(dá)。
結(jié)果:
1.一般情況8周后,正常組大鼠狀態(tài)良好,體重增加,攝食、飲水以及日?;顒?dòng)均正常。各模型組大鼠出現(xiàn)毛發(fā)蓬松、蜷臥拱背,體重下降、攝食、飲水及活動(dòng)減少等情況。中藥大、小劑量組及西洛他唑組表現(xiàn)類似,但程度較模型組輕。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后模型組死亡3只,西洛他唑組死亡2只,大劑量與小劑量組各死亡1只,死亡原因與灌胃有關(guān)。
4、> 2.各組大鼠體重變化見表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組大鼠體重較正常組明顯降低(p﹤0.05)。中藥組體重高于模型組及西洛他唑組,其中中藥大劑量組體重高于除正常組外各用藥組。
3.各組大鼠血糖變化見表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組糖尿病模型大鼠血糖均較正常組明顯升高(p﹤0.05,p﹤0.01),中藥各組血糖較模型組有下降(p﹤0.05,p﹤0.01),但與正常組相比仍明顯升高,說(shuō)明其調(diào)節(jié)血糖的作用不明顯。西洛他唑組血糖與模型組相比無(wú)顯
5、著差異性,說(shuō)明其無(wú)調(diào)節(jié)血糖作用。
4.各組大鼠CD34的表達(dá)水平分析見表2。從表2中可以看出,各成模組糖尿病大鼠CD34含量較正常對(duì)照組明顯升高(p<0.01),與模型組比較,西洛他唑組與中藥組均有CD34的高表達(dá),以中藥大劑量組最為明顯(p<0.01)。
5.各組大鼠缺血區(qū)MVD的比較見表3。與正常組相比,大、小劑量組、西洛他唑組、模型組大鼠坐骨神經(jīng)缺血區(qū)MVD 明顯增多(p<0.05,p<0.01);其中
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