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文檔簡介
1、目的:檢測血紅素加氧酶(Heme Oxygenase,HO-1)和膽綠素還原酶A(BLVRA)在盧氏雞和固始雞輸卵管子宮部表達量水平,分析HO-1和BLVRA在盧氏雞和固始雞表達量差異,以此為依據(jù)探索綠殼蛋的形成機理,為盧氏雞產綠殼蛋研究提供理論依據(jù)。
方法:本試驗以24周齡產綠殼蛋盧氏雞和產褐殼蛋固始雞為素材,各隨機選取5只,采集每只雞輸卵管子宮部,根據(jù)TRial RNA提取試劑盒上的方法提取總RNA,經過RT-PCR反轉錄
2、為cDNA,設計上下游引物,以與色素相關的HO-1和BLVRA為目的基因,選擇GAPDH作為內參基因,通過實時熒光定量PCR,分析HO-1和BLVRA在不同品種雞的機體內轉錄水平的差異。
結果:提取的總RNA,通過1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測,28S、18S兩條帶較亮,5S條帶模糊,說明提取的總RNA質量較好。通過實時熒光定量PCR測的,HO-1在盧氏雞和固始雞中表達量分別為0.1581±0.0278和0.0299±0.0050;
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