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文檔簡介
1、目的：研究溶酶體組織蛋白酶L(Cathepsin L)在X射線誘導(dǎo)的人腦膠質(zhì)瘤侵襲遷移中的作用及調(diào)控機制。
方法：采用Cathepsin L特異性抑制劑Z-FY-CHO或shRNA干擾的方式降低U251細胞中Cathepsin L的表達，并聯(lián)合X射線處理細胞，通過細胞劃痕實驗及Matrigel侵襲實驗檢測U251細胞的遷移、侵襲能力的改變；Western blot和免疫熒光法檢測各處理組細胞中Cathepsin L的變化及侵襲
2、相關(guān)蛋白RhoA、CDC42、MMP-2、MMP-9、CXCR4、CCR7的表達；Rho/CDC42 Activation Assay的方法測定細胞骨架蛋白RhoA及CDC42的活性蛋白；鬼筆環(huán)肽染色及免疫熒光法觀察細胞骨架結(jié)構(gòu)的改變。
結(jié)果：X射線能明顯增加U251細胞Cathepsin L蛋白的表達，并增強細胞的遷移及侵襲能力。Z-FY-CHO及Cathepsin L shRNA可減少由X射線誘導(dǎo)的Cathepsin L的
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