STAT3在膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中的表達(dá)及轉(zhuǎn)染SiRNA-STAT3后對U251細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：探討STAT3在膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中的表達(dá)情況及在U251細(xì)胞中導(dǎo)入SiRNA-STAT3后STAT3以及與STAT3相關(guān)的P53、P21、Cyclin A、Cyclin E的表達(dá)趨勢和細(xì)胞的生長情況，進一步探討STAT3對膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞周期的影響以及可能的機制。
　　方法：通過免疫組化（SP）法，檢測膠質(zhì)瘤組織中STAT3的表達(dá)情況，后將SiRNA-STAT3轉(zhuǎn)染入膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞后，利用Western blot檢測

2、轉(zhuǎn)染前后膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中STAT3的表達(dá)情況，對轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞通過MTT法檢測細(xì)胞的增殖活性，用劃痕實驗檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的遷移情況。最后用Western blot檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞內(nèi)P53、P21、Cyclin A、Cyclin E蛋白的表達(dá)情況以及變化趨勢。
　　結(jié)果：1.免疫組化結(jié)果顯示：膠質(zhì)瘤組織中STAT3呈現(xiàn)高表達(dá)。2.Western blot結(jié)果顯示：SiRNA-STAT3轉(zhuǎn)染前后STAT3的表達(dá)情況與空白組（Mock組

3、）、空載組相比較，SiRNA-STAT3組的STAT3的表達(dá)在轉(zhuǎn)染后明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而Mock組和空載組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。轉(zhuǎn)染后P53、P21蛋白表達(dá)增強，而Cyclin A、Cyclin E蛋白表達(dá)減弱，SiRNA-STAT3組與Mock組及空載組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），Mock組和空載組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。3.MTT結(jié)果顯示：與空載組和Mock組相比，SiRNA-STAT3組細(xì)胞增殖明

4、顯減慢（P<0.05）。4.劃痕實驗結(jié)果顯示：劃痕24h后，Mock組細(xì)胞就已經(jīng)遷移越過劃痕范圍，空載組遷移能力較正常細(xì)胞略差，而SiRNA-STAT3組進入空白處的細(xì)胞明顯減少，細(xì)胞遷移能力受到抑制。
　　結(jié)論：1.通過轉(zhuǎn)染獲得低表達(dá)或不表達(dá)STAT3的U251細(xì)胞模型，STAT3表達(dá)下降會抑制膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞增殖，并使P21、P53在蛋白水平表達(dá)增高；Cyclin A、CyclinE在蛋白水平表達(dá)降低。2.通過轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤U2