棉花生防芽孢桿菌A57、A178的抑菌機理、拮抗活性物質及防病、促生作用.pdf

1、本試驗對拮抗細菌A57、A178進行了種的分類地位的鑒定，研究了拮抗細菌A57、A178對棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黃萎病菌的抑菌機理，初步研究了A57、A178產生的拮抗物質主要成分及拮抗物質的理化性質，同時初步研究了兩株菌對植物的促生作用和棉花立枯病、棉花枯萎病和棉花黃萎病的室內防治試驗，研究結果如下： 1 A57、A178分類地位的鑒定通過培養(yǎng)形態(tài)、生理生化特征以及16SrDNA的分子序列同源性分析，16SrDNA測

2、序結果在GeneBank數(shù)據庫進行同源性比較，確定A57為短短芽孢桿菌(Brevibacillus brevs)，A178菌株為枯草芽胞桿菌(Bacillus subtilis)。 2 A57、A178的抑菌機理通過平板對峙培養(yǎng)法，發(fā)現(xiàn)A57、A178對棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黃萎病菌具有較強的抑菌作用，通過顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)拮抗細菌A57、A178的主要拮抗機理是通過產生拮抗物質造成病原真菌菌絲體斷裂、扭曲、畸形，抑制分

3、生孢子的萌發(fā)，造成孢子畸形。 3 A57、A178抑菌物質的提取和拮抗物質的理化性質采用不同濃度硫酸銨鹽沉淀法提取拮抗蛋白。以枯萎病菌作指示菌，結果表明A57、A178在70﹪的硫酸銨飽和度下粗提蛋白的拮抗活性最大，抑制率分別為23.7﹪、22.3﹪。分別對A57、A178粗提蛋白理化性質研究，結果表明兩菌粗提蛋白對熱均穩(wěn)定，對氯仿均不敏感，對胰蛋白酶均為敏感；A57、A178拮抗活性最佳pH值為pH5-pH7，強酸pH3和強堿

4、pH9條件下仍具有部分的拮抗活性。 4 A57、A178的防病、促生作用利用A57、A178無細胞濾液不同稀釋度處理棉花種子對立枯病、枯萎病和黃萎病進行營養(yǎng)缽試驗，A57和A178稀釋10倍液對枯萎病的防效相當，分別是56.8﹪，54.4﹪；A178稀釋10倍無細胞濾液對立枯病菌的防效最好，防效是63.1﹪。通過A57、A178不同稀釋度無細胞濾液培養(yǎng)棉花無菌胚，發(fā)現(xiàn)無細胞濾液對幼苗均具有一定的促生作用，其中A57稀釋10倍液對