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1、本研究采用了苗床接種、生防菌混合接種等接種方法研究了不同接種方法對(duì)辣椒防病促生作用及根區(qū)微生態(tài)的影響,并對(duì)供試菌進(jìn)行了鑒定,得出以下結(jié)果: 1.供試5株辣椒疫病生防菌包括3株放線菌Act1、Act2及Act8,1株細(xì)菌B和1株真菌F。對(duì)其中的Actl、Act8及B進(jìn)行了形態(tài)及生理生化鑒定。根據(jù)放線菌形態(tài)與培養(yǎng)特征分析,Actl、Act8均為鏈霉菌屬(Streptomycessp.)。16SrDNA序列分析初步表明,細(xì)菌B與多食鞘
2、氨醇桿菌(Sphingobacterium multivorum)的同源性達(dá)到97.6%,Actl與細(xì)黃鏈霉菌(Streptomyces microflavus)的同源性達(dá)98.3%。 2.利用牛津杯法和瓊脂塊法測(cè)定了供試菌之間的相互作用。皿內(nèi)拮抗試驗(yàn)表明:細(xì)菌B的無(wú)菌發(fā)酵液對(duì)Act8及F的無(wú)菌發(fā)酵液對(duì)Act2、Act8的孢子形成有抑制作用,Act2及Act8對(duì)真菌F生長(zhǎng)有輕度抑制作用。其余菌株之間均無(wú)相互抑制作用。該結(jié)果為解釋
3、生防菌混合接種時(shí)產(chǎn)生的正負(fù)效應(yīng)提供了科學(xué)依據(jù)。 3.生防菌劑接種量不同時(shí)對(duì)辣椒的防病促生作用和誘導(dǎo)抗性會(huì)產(chǎn)生不同影響: ①接種量過低(0.5g/kg)或過高(2.5g/kg)時(shí),對(duì)辣椒疫病的防效較差,適量接種(1.5g/kg)時(shí)的相對(duì)防效達(dá)到66.7%。 ②在辣椒不同生育期,生防菌不同接種量對(duì)辣椒的促生作用表現(xiàn)不同。菌劑用量為0.5-2.5g/kg時(shí),辣椒總生物量和根系鮮重較對(duì)照增率均值在幼苗期分別為81.8%和
4、78.2%,在成熟期分別為10.4%和18.5%。菌劑用量過大,抑制辣椒生長(zhǎng)。如菌劑用量2.5g/kg且接種病原菌時(shí),辣椒總生物量和根系鮮重較對(duì)照分別降低18.8%和14.o%。 ③接種生防菌劑可使盆栽辣椒葉片PPO活性大幅度提高,根系PPO活性大幅度降低。接種量為0.5-2.5g/kg時(shí),接種后12d和25d時(shí),辣椒葉片PPO活性分別提高了23.1%-76.9%和1.4%-54.8%;27d時(shí)根系PPO活性降低了51.1%-6
5、7.2%。從防病促生作用綜合考慮,生防菌劑推薦用量為1.5-2.0g/kg。 4.苗床拌土接種生防菌制劑可產(chǎn)生如下效果: ①明顯增加了辣椒根域土壤中細(xì)菌和放線菌數(shù)量,減少真菌數(shù)量,改變根域土壤中微生物組成,促使辣椒根域土壤微生物類型由真菌型向細(xì)菌型轉(zhuǎn)變。其中接種生防真菌F后,小區(qū)辣椒根區(qū)土壤細(xì)菌、放線菌數(shù)量較對(duì)照分別增加了166.7%和46.2%,細(xì)菌、放線菌與真菌的數(shù)量比值B/F、A/F分別較對(duì)照增加了207.7%和7
6、2.2%。 ②顯著增加了辣椒根表土壤芽孢桿菌數(shù)量,減少根區(qū)土壤芽孢桿菌數(shù)量,根表芽孢桿菌數(shù)量增幅和根區(qū)土壤芽孢桿菌數(shù)量降幅分別為7.5%~246.8%和11.9%~74.5%。 ③顯著增加了辣椒根內(nèi)細(xì)菌和放線工;菌數(shù)量,其中芽孢桿菌數(shù)量增加明顯;接種生防放線菌Act2后,細(xì)菌、芽孢桿菌和放線菌數(shù)分別增加了314.8%,408.1%和77.3%。 ④顯著提高了小區(qū)辣椒產(chǎn)量,其中接種生防放線菌Act8后,鮮椒總產(chǎn)量較
7、對(duì)照增加了48.8%。苗床拌土接種生防菌后,在辣椒收獲期,小區(qū)辣椒根區(qū)、根表土壤中仍有大量生防放線菌檢出(105~106g-1),表明接入的生防菌可在辣椒根區(qū)土壤中長(zhǎng)時(shí)間定殖、存活,持續(xù)發(fā)揮生防作用。 5.在苗床和盆栽試驗(yàn)中,生防菌接種對(duì)辣椒產(chǎn)生以下影響: ①單接和混接生防菌對(duì)辣椒有顯著的促生作用。苗床試驗(yàn)中,接種處理辣椒總生物量和根鮮重分別較對(duì)照提高127.2%-543.4%和17.4%-265.2%,提高均值分別為3
8、13.6%和124.2%。接種辣椒苗移栽至田間后接種的促生作用仍然存在,表現(xiàn)在成熟期接種處理辣椒總生物量、根鮮重及鮮椒產(chǎn)量分別較對(duì)照提高14.6%-60.5%、21.4%.108.1%及35.9%-142.5,提高均值分別為36.9%、47.9%及75.4%。接種處理在盆栽辣椒上的促生效應(yīng)與之類似。 ②單接和混接生防菌對(duì)辣椒疫病有明顯的防效。在盆栽試驗(yàn)中,同時(shí)接種辣椒疫霉和生防菌時(shí),接生防菌處理14天時(shí)的相對(duì)防效為0-74.8%
9、,單接及混接處理的相對(duì)防效分別為20.6%-50.0%及0-74.8%,其均值分別為38.1%及48.1%,其中2F混接、Act2及F單接的防效分別為74.8%、24.9%及50.0%,表明混接的防效略優(yōu)于單接。 ③皿內(nèi)拮抗性試驗(yàn)中表現(xiàn)相互抑制的兩株菌混合接種時(shí),兩株菌的混接效應(yīng)在辣椒總生物量和根鮮重上表現(xiàn)為負(fù)效應(yīng)。如Act8與F在皿內(nèi)相互抑制,Act8對(duì)苗床辣椒總生物量和根鮮重的增量分別為-2.32和-0.16,F(xiàn)對(duì)苗床辣椒總
10、生物量和根鮮重的增量分別為-4.98和-0.46。皿內(nèi)無(wú)相互抑制的兩株菌混合接種時(shí),各個(gè)菌株在混合處理中表現(xiàn)出的正負(fù)效應(yīng)無(wú)明顯規(guī)律性。 6.生防菌單獨(dú)和混合接種對(duì)苗床試驗(yàn)和盆栽試驗(yàn)辣椒誘導(dǎo)抗性產(chǎn)生以下影響: ①苗床接種生防菌后,45.5%的接種處理辣椒幼苗根系PPO活性較對(duì)照提高,平均增幅為28.3%。 ②盆栽辣椒接種生防菌后,63.6%的接種處理苗期葉片PPO活性較對(duì)照提高,增幅均值為18.3%,81.8%的接
11、菌處理根系PPO活性較對(duì)照降低,平均降幅為23.0%。在成熟期,病原菌接入與否影響生防菌對(duì)葉片和根系PPO活性的誘導(dǎo):未接病原菌時(shí),90.9%的生防菌接種處理葉片PPO活性下降,降幅均值23.5%;接病原菌后,54.5%的生防菌接種處理葉片PPO活性下降,平均降幅11%。 ③生防菌對(duì)辣椒根系PPO活性的誘導(dǎo)作用受病原菌的影響:未接種病原菌時(shí),36.4%的生防菌接種處理辣椒根系PPO活性提高,平均增幅12.8%;接病原菌后,100
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