PLK1抑制劑BI6727增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞對Taxol的化療敏感性.pdf

1、目的:
　　PLK1在有絲分裂的不同階段都發(fā)揮重要作用,是治療惡性腫瘤藥物開發(fā)的主要目標(biāo)基因。紫杉醇是卵巢癌治療最常用的化療藥物之一,但是,紫杉醇耐藥是限制其臨床應(yīng)用的一個(gè)重要因素。因此,我們檢測PLK1抑制劑BI6727單藥及聯(lián)合taxol對卵巢癌細(xì)胞生長的影響以尋找有效且安全的抗癌療法。
　　方法:
　　(1)用免疫組織化學(xué)方法檢測PLK1在正常卵巢組織和卵巢癌組織中的表達(dá)情況;
　　(2)用CCK8檢測方法

2、探索BI6727單藥處理卵巢癌細(xì)胞的濃度規(guī)律;
　　(3)用CCK8、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞凋亡的流式細(xì)胞儀檢測等方法研究BI6727與Taxol聯(lián)合用藥對卵巢癌細(xì)胞的影響;
　　(4)用Western blotting方法探索BI6727與Taxol聯(lián)合用藥效應(yīng)的機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　(1)PLK1在卵巢癌組織中的表達(dá)要高于正常卵巢組織。用DAB染色計(jì)分標(biāo)準(zhǔn),卵巢癌組織中PLK1表達(dá)平均分為199±44,正常

3、卵巢組織為133±22,P<0.05。
　　(2)卵巢癌細(xì)胞SKOV3、OV2008、A2780隨著BI6727濃度的增加,細(xì)胞的抑制增殖效應(yīng)不斷增強(qiáng)。在BI6727 1nM和10nM時(shí),抑制增殖效應(yīng)尚不明顯;但50nM時(shí),抑制效應(yīng)明顯增強(qiáng);≥500nM時(shí),抑制效應(yīng)繼續(xù)增加的趨勢不再明顯。
　　(3)在保持BI6727 10nM濃度不變的情況下,與Taxol聯(lián)用后細(xì)胞毒性呈協(xié)同增強(qiáng)效應(yīng)。與10nM Taxol聯(lián)用時(shí),細(xì)胞毒性

4、比Taxol單藥時(shí)明顯增強(qiáng)。當(dāng)Taxol濃度≥100nM時(shí),單藥與聯(lián)合用藥的細(xì)胞毒效應(yīng)差別不再明顯。BI6727+Taxol聯(lián)合用藥所得凋亡細(xì)胞百分比分別與BI6727單藥和Taxol單藥所得凋亡細(xì)胞百分比進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析比較,均P<0.05。
　　(4)當(dāng)聯(lián)合用藥時(shí),PARP切割片段、Bax、Cyclin B1和H3P表達(dá)增加,bcl-xl表達(dá)明顯下降。
　　結(jié)論:
　　PLK1可能是一個(gè)改善卵巢癌Taxol敏感性的有