大鼠新型氣管插管方法的建立與Epo對心肺復蘇后心肌的影響.pdf

1、背景:大鼠是常用的實驗研究動物，但由于體型小，口腔狹窄，暴露聲門難度大，大鼠氣管插管一直是個難題。文獻報道的大鼠氣管插管方法主要有：氣管切開插管法，盲插法，直視下插管法。既往的方法都它的局限性，容易出現(xiàn)插管失敗和并發(fā)癥。因此，有必要尋求一種新的插管方法，實現(xiàn)安全、準確的大鼠氣管插管。利用氣管導管內(nèi)置入直徑為0.9mm的光纖作為光源和導絲，建立一種新型大鼠氣管插管方法。 復蘇后心功能不全主要表現(xiàn)為低血壓、休克、致命性的室性心律失常

2、或再次發(fā)生心跳停搏，是心臟驟?；颊邚吞K后早期死亡的首要原因。約60％-70％成功復蘇后的患者因出現(xiàn)低血壓、休克或致命性室性心律失常而于24h內(nèi)死亡，最終只有4.5％能存活出院。復蘇后心功能不全主要歸因于心臟驟停期間處于的全心缺血狀態(tài)以及再灌注后所致的心肌損傷。 促紅細胞生成素（Epo）是分子量為34KDa的糖蛋白類激素，主要作用于紅系祖細胞，調(diào)節(jié)血循環(huán)中的紅細胞容積。最近發(fā)現(xiàn)，Epo能在缺血再灌注中發(fā)揮廣泛的組織保護作用，包括心

3、臟、大腦、視網(wǎng)膜、腎臟、肝臟和皮膚等。在心肌缺血再灌注實驗研究中，Epo能減少心肌梗死面積和減輕缺血再灌注損傷，改善心功能。 基于缺血再灌注損傷是復蘇后機體的主要病理生理過程。在心肺復蘇期間給予Epo，有望發(fā)揮心肌保護作用，改善復蘇后心功能。 第一部分大鼠新型氣管插管方法的建立 1.研究目的:利用氣管導管內(nèi)置入直徑為0.9mm的光纖作為光源，建立一種新型的大鼠經(jīng)口氣管插管方法。 2.研究方法:將Sprag

4、ue-Dawley大鼠分為2組（n=40）：i）傳統(tǒng)光源直視下的經(jīng)口氣管插管組（簡稱傳統(tǒng)直視組n=20），ii）氣管導管內(nèi)置入光纖引導下的經(jīng)口氣管插管組（簡稱光纖引導組n=20）。比較兩組間的經(jīng)口氣管插管時間、插管次數(shù)、一次插管成功率。將上述經(jīng)口氣管插管的大鼠，與小型動物呼吸機連接，調(diào)整呼吸頻率（60次，分）和潮氣量（0.65ml/100g），持續(xù)通氣60min后拔除氣管插管，并比較拔除氣管插管后1周的存活率。 3.結(jié)果

5、 3.1光纖引導組的經(jīng)口氣管插管時間和插管次數(shù)[（36.00±16.43）s和（1.05±0.22）]，均較傳統(tǒng)直視組明顯減少[（86.20±56.48）s和（1.75±1.02）]。 3.2光纖引導組的經(jīng)口氣管插管一次成功率（95％）高于傳統(tǒng)直視組（60％）。 3.3光纖引導組拔除氣管插管后的1周存活率（100％）高于傳統(tǒng)直視組（80％）；但其差異無統(tǒng)計學意義。 4.結(jié)論:氣管導管內(nèi)光纖引導下的經(jīng)口氣管插管法是

6、一種創(chuàng)新的大鼠氣管插管方法，能實現(xiàn)快速、有效、準確的氣管插管，值得推廣應用。 第二部分促紅細胞生成素對心肺復蘇后心肌的影響 1.研究目的:觀察窒息性大鼠心臟驟停-心肺復蘇后的心功能和心肌損傷的情況；探討促紅細胞生成素對大鼠心肺復蘇后的心肌保護作用。 2.研究方法:夾閉氣管8min，建立窒息性大鼠心臟驟停-心肺復蘇動物模型。Sprague-Dawley大鼠（n=24），隨機分為3組：i）正常對照組（n=8）：進行氣

7、管插管、血管置管，不予夾閉氣管和心肺復蘇。ii）常規(guī)心肺復蘇（CPR）組（n=8）：夾閉氣管8min后，進行胸外按壓、機械通氣和腎上腺素0.02mg/kg，于恢復自主循環(huán)（ROSC）后3min經(jīng)股靜脈推注0.9％NaCl0.5ml。iii）Epo治療組（n=8）：夾閉氣管8min后，進行胸外按壓、機械通氣和腎上腺素0.02mg/kg，于ROSC后3min，將Ep05000U/kg與0.9％NaCl稀釋成0.5ml后，注入股靜脈。所有大鼠

8、經(jīng)右頸總動脈逆行插管至左心室和股動脈插管，持續(xù)監(jiān)測心率（HR）、平均動脈壓（MAP）、左室收縮壓（LVSP）、左室舒張末壓（LVEDP）、左室內(nèi)壓上升和下降最大變化速率（+dp/dtmax）和標準Ⅱ?qū)?lián)心電圖，肛門插入內(nèi)置式溫度探頭記錄深部直腸溫度，用加熱燈保持體溫在36.5±0.5℃。于觀察終點（ROSC后120min），采集血樣測定血清CTnl含量，取出心臟，光鏡和透射電鏡觀察心肌組織的損傷情況。 3.結(jié)果 3.1三

9、組間基線水平的HR、MAP、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax無顯著性差異。 3.2常規(guī)CPR組和Epo治療組大鼠自主循環(huán)復蘇后（ROSC）30min、60min、90min、120min的HR、MAP、LVSP和+dp/dtmax均正常對照組明顯下降，ROSC120min的LVEDP較正常對照組明顯升高。 3.3常規(guī)CPR組ROSC后120min血清CTnl水平較正常對照組明顯升高；常規(guī)CPR組出現(xiàn)心肌細胞水腫變

10、性、壞死、炎癥細胞浸潤，以及胞膜完整性喪失、線粒體腫脹、嵴斷裂、溶解等心肌組織的損傷性改變。 3.4 Epo治療組ROSC后30min、60min、90min、120min的LVSP、±dp/dtmax較常規(guī)CPR組明顯升高，ROSC120min的LVEDP較常規(guī)CPR組降低，兩組間的HR和MAP無顯著性差異。 3.5同組內(nèi)不同時間點比較顯示，正常對照組的各項血流動力學指標無顯著性，常規(guī)CPR組和Epo治療組ROSC30

11、 min、60min、90min、120min的HR、MAP、LVSP和±dp/dtmax較各自的基線水平明顯下降；ROSC120min的LVEDP較各自的基線水平顯著升高，而常規(guī)CPR組和Epo治療組ROSC30 min、60min、90min、120min之間無顯著性差異。 3.6 Epo治療組水平與常規(guī)CPR組ROSC后120min血清CTnI水平無顯著性差異；心肌組織的病理學結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)的損傷性改變較常規(guī)CPR組減輕。

12、 4.結(jié)論 4.1窒息性大鼠心臟驟停-心肺復蘇成功后存在心功能不全和心肌損傷。 4.2 Epo可以改善窒息性大鼠心臟驟停-心肺復蘇成功后的心功能和減輕心肌損傷。 全文結(jié)論 1.氣管導管內(nèi)光纖引導下的經(jīng)口氣管插管法是一種創(chuàng)新的大鼠氣管插管方法，能實現(xiàn)快速、有效、準確的氣管插管，值得推廣應用。 2.窒息性大鼠心臟驟停-心肺復蘇成功后存在心功能不全和心肌損傷。 3.Epo能改善窒息性大鼠