大鼠心肺復(fù)蘇后心腦損傷及三種中藥湯劑的干預(yù)作用.pdf

1、目的： 采用大鼠窒息型心臟驟停模型，觀察大鼠心肺復(fù)蘇后血流動力學(xué)變化，腦組織含水量，血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白I(cTnI)的濃度，血清和腦組織勻漿液S100B蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)的濃度，皮層和海馬CA1區(qū)Bax、Bcl-2和Fas蛋白的表達(dá)，皮層和海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡情況，并用三種中藥湯劑進(jìn)行干預(yù)，研究大鼠心肺復(fù)蘇(CPR)后心腦的損傷情況及三種中藥湯劑對心腦的保護(hù)作用。 方法：

2、 成年雄性Spragtle-Dauley(SD)大鼠40只，隨機(jī)分為假手術(shù)對照組(A組)、復(fù)蘇組(B組)、補(bǔ)陽還五湯組(C組)、星蔞承氣湯組(D組)和鎮(zhèn)肝熄風(fēng)湯組(E組)。建立窒息型大鼠心肺復(fù)蘇模型，各組于自組循環(huán)恢復(fù)后24小時(shí)取樣，以干濕比重法測定腦組織含水量；采用免疫抑制法測定血清CK-MB含量，Access免疫化學(xué)發(fā)光分析儀以及其配套試劑測定血清cTnI含量；采用雙抗體夾心免疫吸收分析法(ELISA)測定血清和腦組織勻漿液S100

3、B蛋白、NSE的水平；免疫組化方法測定皮層和海馬CA1區(qū)Bax、Bcl-2和Fas蛋白的表達(dá)情況；原位細(xì)胞凋亡法測定皮層和海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1、大鼠心肺復(fù)蘇前后血流動力學(xué)指標(biāo)變化為：與A組比較，B組、C組、D組和E組大鼠心率在自主循環(huán)恢復(fù)(ROSC)后0.5小時(shí)，ROSC后1小時(shí)，ROSC后2小時(shí)均明顯下降(P＜0.01)；與A組比較，B組、C組、D組和E組的左心室收縮壓(LVSP)在ROSC后0

4、.5小時(shí)和ROSC后1小時(shí)均明顯下降(P＜0.01)；與A組比較，B組、C組、D組和E組大鼠左心室舒張末壓(LVEDP)在ROSC即刻和ROSC后0.5小時(shí)均明顯上升(ROSC即刻P＜0.01，ROSC后1小時(shí)P＜0.05)；與A組比較，B組、C組、D組和E組大鼠左室內(nèi)壓的最大上升速率(+dp/dtmax)在ROSC后0.5小時(shí)，ROSC后1小時(shí)，ROSC后2小時(shí)均顯著下降(P＜0.01或P＜0.05)；與A組比較，B組、C組、D組和E

5、組大鼠左室內(nèi)壓的最大下降速率(一dp/dtmax)在ROSC后0.5小時(shí)，ROSC后1小時(shí)，ROSC后2小時(shí)均顯著下降(P＜0.01或P＜0.05)。 2、大鼠心肺復(fù)蘇ROSC后24小時(shí)血清CK-MB和cTnI濃度：B組、C組、D組和E組的血清CK-MB和cTnI均較A組顯著升高(P＜0.01)；與B組比較，C組、D組和E組血清CK-MB和cTnI濃度明顯降低(P＜0.01)。 3、大鼠心肺復(fù)蘇ROSC后24小時(shí)腦水含量

6、：與B組比較，C組、D組和E組的腦水含量均低于復(fù)蘇組(P＜0.05)。 4、大鼠心肺復(fù)蘇ROSC后24小時(shí)血清和腦組織S100B蛋白濃度：與B組比較，C組、D組和E組血清S100B蛋白濃度明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，三種藥物組之間無顯著性差異；與B組比較，C組的腦組織S100B蛋白濃度顯著降低(P＜0.01)；D組和E組與B組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；與D組、E組比較，C組腦組織S100B蛋白明顯較低(P＜0.01)。

7、 5、大鼠心肺復(fù)蘇ROSC后24小時(shí)血清和腦組織NSE濃度：與B組比較，C組、D組和E組血清NSE濃度明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，三種藥物組之間無顯著差異；與B組比較，C組、D組和E組腦組織NSE濃度顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)；與E組相比較，C組腦組織NSE濃度顯著較低(P＜0.05)。 6、大鼠心肺復(fù)蘇ROSC后24小時(shí)大腦皮層Bax，Bcl-2，F(xiàn)as蛋白表達(dá)：與B組比較，C組、D組和E組Bax蛋白

8、的表達(dá)顯著降低(P＜0.01)，C組、D組和E組Bcl-2蛋白的表達(dá)顯著升高(P＜0.01)，C組、D組和E組Fas蛋白的表達(dá)明顯降低(P＜0.05)；三種藥物組之間Bax、Bcl-2和Fas蛋白的表達(dá)均無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 7、大鼠心肺復(fù)蘇ROSC后24小時(shí)海馬CA1區(qū)Bax，Bcl-2，F(xiàn)as蛋白表達(dá)：與B組比較，C組、D組和E組Bax蛋白的表達(dá)顯著降低(P＜0.01)；與B組比較，C組、D組和E組Bcl-2蛋白的表達(dá)顯著升高

9、(P＜0.01或P＜0.05)；與B組比較，C組、D組和E組Fas蛋白的表達(dá)顯著降低(P＜0.01或P＜0.05)；三種藥物組之間Bax、Bcl-2和Fas蛋白的表達(dá)均無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 8、大腦皮層和海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡的變化：與B組比較，C組、D組和E組皮層和海馬CA1區(qū)的細(xì)胞凋亡表達(dá)均顯著降低(P＜0.01或P＜0.05)，三種藥物組之間皮層和海馬CA1區(qū)細(xì)胞凋亡表達(dá)均無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論： 1、大鼠心

10、肺復(fù)蘇早期就出現(xiàn)心肌血流動力學(xué)指標(biāo)和生化指標(biāo)的異常，心肌收縮和舒張功能受損。三種中藥湯劑不能直接改善血流動力學(xué)指標(biāo)能，但能減低心肌酶學(xué)水平，減輕心肌細(xì)胞損傷。 2、大鼠心肺復(fù)蘇后腦水含量增加，血清和腦組織勻漿S100B蛋白、NSE濃度升高，皮層和海馬CA1區(qū)凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2、Fas以及腦細(xì)胞凋亡的表達(dá)增加，存在明顯腦損傷。三種中藥湯劑能在不同程度上改善腦損傷指標(biāo)，具有一定的腦保護(hù)作用，其中以補(bǔ)陽還五湯作用更明顯。