水溶性三苯基四氮唑鹽類細(xì)胞活性檢測(cè)劑的合成工藝研究.pdf

1、細(xì)胞活性檢測(cè)劑是指用于檢測(cè)細(xì)胞生理狀態(tài)和功能是否正常的一類生物試劑。該類生物試劑中，含水溶性三苯基四氮唑鹽類的試劑應(yīng)用前景很好，而CellCountingKit-8即是其中的一種。CellCountingKit-8是由日本同仁研究所開(kāi)發(fā)的一種細(xì)胞活性檢測(cè)劑，相對(duì)于其他檢測(cè)劑來(lái)說(shuō)，使用方便，無(wú)需有機(jī)溶劑和放射性同位素，靈敏度高，重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確，但價(jià)格昂貴。目前，國(guó)內(nèi)對(duì)CellCountingKit-8的合成研究較少。
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2、ellCountingKit-8主要含有WST-8和1-甲氧基PMS兩種成分，二者市售價(jià)格很高。其中，WST-8是一種水溶性三苯基四氮唑鹽，四氮唑鹽的合成方法有很多種，存在后處理困難、氧化劑毒性大、收率低等問(wèn)題。1-甲氧基PMS是一種吩嗪硫酸二甲酯鹽，其合成的關(guān)鍵在于吩嗪母核的合成。吩嗪母核的合成方法很多，但也存在副產(chǎn)物多、條件苛刻、收率低等問(wèn)題，一般不適合工業(yè)化大生產(chǎn)。
　　 本論文主要針對(duì)CellCountingKit-8的

3、合成工藝進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，并嘗試?yán)米灾频腤ST-8與1-甲氧基PMS配制成一種新的用于細(xì)胞活性檢測(cè)的生物試劑，具體研究?jī)?nèi)容如下:
　　 一、對(duì)細(xì)胞活性檢測(cè)劑的種類、優(yōu)缺點(diǎn)做了文獻(xiàn)調(diào)研并總結(jié)。
　　 二、對(duì)CellCountingKit-8的研究?jī)r(jià)值、四氮唑鹽的特點(diǎn)與合成方法、吩嗪類化合物的特點(diǎn)與合成方法進(jìn)行了文獻(xiàn)調(diào)研并總結(jié)。
　　 三、考察了WST-8的合成方法，進(jìn)行了路線設(shè)計(jì)、合成并對(duì)其反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化選擇

4、。我們找到了一條后處理簡(jiǎn)單、氧化安全、易于操作、成本較低的反應(yīng)路線。
　　 四、考察了1-甲氧基PMS的合成方法，進(jìn)行了路線設(shè)計(jì)、合成并對(duì)其反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化。我們找到了一條原料價(jià)廉易得、氧化效率高、操作簡(jiǎn)便、安全的反應(yīng)路線。
　　 五、利用紫外可見(jiàn)全波長(zhǎng)掃描、高效液相方法，分別找到一種適合WST-8與1-甲氧基PMS含量測(cè)定的方法，并驗(yàn)證其專屬性、精密度、穩(wěn)定性。依此，我們有希望在配制成新的試劑后，確定其有效使用時(shí)間及最