卵巢早衰的相關(guān)候選基因及臨床研究.pdf

1、目的：探討雄激素受體(AR)基因CAG重復(fù)序列及脆性X智力障礙基因-1((FMR1)CGG重復(fù)序列與特發(fā)性卵巢早衰(POF)發(fā)病的關(guān)系；特發(fā)性POF患者脂代謝及骨代謝的變化，激素替代治療(HRT)對(duì)其脂代謝及骨代謝的影響；對(duì)POF不孕患者診療策略的探討。
　　材料方法：選擇2009年6月～2011年6月就診于天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦科內(nèi)分泌門診及秦皇島市第一醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)門診的特發(fā)性POF患者85例，選擇80例正常月經(jīng)健康女性>40歲者

2、作為對(duì)照組，提取外周血DNA，PCR擴(kuò)增，采用瓊脂糖凝膠電泳獲取目的基因，基因測(cè)序，分別檢測(cè)AR基因CAG重復(fù)序列及FMR1基因CGG重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)。
　　選擇2009年2月～2011年9月就診于天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦科內(nèi)分泌門診及秦皇島市第一醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)門診的特發(fā)性卵巢早衰患者105例，其中POF不孕患者34例，同年齡段健康女性80例為對(duì)照組。POF非不孕患者71例隨機(jī)分為兩組，A組(35例)給予戊酸雌二醇/復(fù)合雌二醇環(huán)丙孕酮

3、(克齡蒙)，B組(36例)給予結(jié)合雌激素(倍美力)0.625mg/d+醋酸甲羥孕酮(MPA)6mg/d，周期序貫治療3個(gè)周期，POF不孕患者給予戊酸雌二醇(補(bǔ)佳樂)2mg/d+黃體酮膠丸200mg/d周期序貫治療3個(gè)周期。各組均于藥物治療前后分別測(cè)定性激素水平、脂代謝指標(biāo)及血糖水平。POF不孕患者當(dāng)FSH水平<15IU/L時(shí)開始應(yīng)用HMG-HCG方案促排卵治療。
　　選擇2009年2月～2010年12月在秦皇島市第一醫(yī)院生殖內(nèi)分泌

4、門診就診的特發(fā)性POF患者62例及同年齡段健康女性60例(對(duì)照組)，比較兩組骨密度(BMD)及骨代謝指標(biāo)。將POF患者隨機(jī)分為兩組(C組、D組)各31例，C組給予戊酸雌二醇/復(fù)合雌二醇環(huán)丙孕酮，D組給予結(jié)合雌激素0.625 mg+醋酸甲羥孕酮6mg周期序貫治療，服藥1年，比較兩組治療前后骨密度、骨代謝指標(biāo)的變化以及副作用的發(fā)生情況。
　　結(jié)果：POF組AR基因(CAG)n重復(fù)序列變異范圍為n=11～34，對(duì)照組變異范圍為n=13～

5、33，兩組最大頻率等位基因分別為n=23及n=22；POF組及對(duì)照組(CAG)n重復(fù)次數(shù)的均數(shù)分別為22.73±3.24、22.03±3.06，差異具有顯著性(P<0.05)；POF組(CAG)n長(zhǎng)片段(n≥23)的發(fā)生頻率高于對(duì)照組，有顯著性差異(P<0.05)。
　　POF組FMR1基因(CGG)n重復(fù)序列變異范圍為n=12～42，對(duì)照組(CGG)n重復(fù)數(shù)目變異范圍為n=10～38，兩組最大頻率等位基因均為n=28；POF組及

6、對(duì)照組(CGG)n重復(fù)次數(shù)的均數(shù)分別為28.06±4.07、26.93±4.37，差異具有顯著性(P<0.05)；POF組(CGG)n中間重復(fù)序列的發(fā)生頻率高于對(duì)照組，有顯著性差異(P<0.05)；未發(fā)現(xiàn)前突變攜帶者。
　　POF組及對(duì)照組，兩組脂代謝指標(biāo)無(wú)顯著性差異；將POF非不孕患者根據(jù)閉經(jīng)時(shí)間分為兩組：≤6個(gè)月為Ⅰ組，>6個(gè)月為Ⅱ組。Ⅱ組患者TC、LDL水平顯著高于Ⅰ組及對(duì)照組，HDL水平顯著低于Ⅰ組及對(duì)照組(P<0.05)

7、，TG、FBG水平無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　POF患者應(yīng)用不同激素替代治療方案治療后雌激素低落癥狀均明顯改善，F(xiàn)SH、LH水平明顯降低，E2水平明顯升高(P<0.05)，AMH、PRL、T水平無(wú)明顯改變，血糖及脂代謝指標(biāo)無(wú)顯著改變(P>0.05)；POFⅡ組患者中應(yīng)用克齡蒙者20例，倍美力+MPA者22例，克齡蒙治療后TC、LDL水平與治療前及倍美力組治療后相比均顯著降低(P<0.05)，HDL水平與治療前相比顯著升高(

8、P<0.05)；倍美力+MPA組與治療前相比血糖及脂代謝指標(biāo)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　POF患者激素替代治療3個(gè)周期后與治療前相比各超聲檢測(cè)指標(biāo)均無(wú)顯著性差異(P>0.05)，治療6個(gè)療程后，子宮體積較治療前明顯增大(P<0.05)，卵巢體積及竇卵泡數(shù)較治療前無(wú)明顯變化(P>0.05)。
　　對(duì)照組不同年齡段健康女性血清FSH、LH、E2水平均無(wú)顯著性差異(P>0.05)；隨著年齡的增長(zhǎng)AMH水平逐漸降低，37-4

9、5歲組與另兩組相比AMH水平顯著降低(P<0.05)，AFC顯著低于另兩組(P<0.05)。
　　POF不孕患者激素替代治療后，1例患者在激素替代治療第3個(gè)周期時(shí)自然妊娠，HRT治療后共27例患者接受了HMG+HCG促排卵治療，其中11例患者卵泡生長(zhǎng)至≥18mm，8例排卵，1例妊娠；余16例患者卵泡直徑<16mm，未孕。有6例患者經(jīng)6個(gè)周期HRT治療后FSH>15IU/L，建議行贈(zèng)卵IVF-ET治療。
　　POF組腰椎及股骨

10、頸的BMD值顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；25-OH-VD3、1，25-OH2-VD3水平均低于對(duì)照組，BGP水平高于對(duì)照組，差異均有顯著性(P<0.05)；POF組腰椎及股骨頸骨密度與雌激素缺乏時(shí)間、FSH水平及BGP水平均呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與年齡、體重指數(shù)、25-OH-VD3、1，25-OH2-VD3水平呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，雌激素水平與腰椎骨密度顯著正相關(guān)(P<0.05)，與股骨頸骨密度無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.

11、05)。初潮年齡及LH水平與POF患者骨密度無(wú)顯著相關(guān)性；POF患者激素替代治療后C、D兩組腰椎及股骨頸BMD與治療前相比顯著升高(P<0.05)；治療后25-OH-VD3，1，25-OH2-VD3水平均顯著高于治療前，BGP水平顯著低于治療前(P<0.05)；兩組副作用發(fā)生情況相似，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)
　　結(jié)論：
　　1.POF患者AR基因CAG重復(fù)序列次數(shù)多于對(duì)照組，CAG長(zhǎng)片段的發(fā)生頻率高于對(duì)照組，AR基

12、因CAG重復(fù)序列次數(shù)增多與POF發(fā)病有關(guān)。
　　2.POF患者FMR1基因(CGG)n重復(fù)次數(shù)多于對(duì)照組，但仍在正常范圍，F(xiàn)MR1基因(CGG)n重復(fù)序列與POF發(fā)病有關(guān)。
　　3.FMR1基因(CGC)n中間重復(fù)序列與POF發(fā)病有關(guān)，本研究中未發(fā)現(xiàn)(CGG)n前突變患者，前突變可能與POF發(fā)病無(wú)關(guān)。
　　4.POF閉經(jīng)時(shí)間>6個(gè)月的患者，發(fā)生脂代謝異常的幾率升高；克齡蒙對(duì)POF患者的脂代謝存在有益影響。
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