電針對(duì)帕金森病模型大鼠紋狀體星形膠質(zhì)細(xì)胞活化與Cx43表達(dá)的影響研究.pdf

1、目的：帕金森?。≒arkinson’s Disease，PD）是中老年人群中最常見(jiàn)的慢性、病程呈進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，在老年人中有較高的患病率和致殘率。我國(guó)現(xiàn)在罹患帕金森病的人數(shù)已超過(guò)100萬(wàn)，而在65歲以上的人群中，PD的發(fā)病率為2％，年齡越高患上PD的概率越大。隨著我國(guó)步入老齡化社會(huì)，預(yù)計(jì)未來(lái)的20年我國(guó)的帕金森病患者將達(dá)到500萬(wàn)。PD在臨床主要表現(xiàn)為靜止性震顫、肌張力增高、運(yùn)動(dòng)遲緩和姿勢(shì)反射障礙,部分患者還有智力的減退

2、甚至殘障，嚴(yán)重影響患者的健康和生存能力。PD的主要特征是中腦的黑質(zhì)紋狀體通路的功能減退，病理表現(xiàn)為黑質(zhì)致密區(qū)多巴胺能神經(jīng)元變性壞死并伴有胞漿內(nèi)嗜酸性包涵體—路易小體（lewy bodies，LB）的形成。
　　PD的發(fā)病機(jī)制目前仍不明確，在對(duì)多巴胺能神經(jīng)元變性、死亡機(jī)制研究的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)在帕金森病患者和動(dòng)物模型中的黑質(zhì)致密部，除了已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的大量多巴胺能神經(jīng)元缺失外，還有星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活。通過(guò)現(xiàn)有的研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞在帕金

3、森病的發(fā)病過(guò)程中有一定作用。本課題采用立體定向注射法,向單側(cè)的紋狀體內(nèi)兩點(diǎn)微量注射六羥基多巴胺來(lái)制備大鼠旋轉(zhuǎn)的PD模型，通過(guò)觀察電針對(duì)帕金森病模型大鼠行為學(xué)的改變、黑質(zhì)損毀側(cè)酪氨酸羥化酶陽(yáng)性神經(jīng)元的計(jì)數(shù)、中腦損毀側(cè)紋狀體Glu濃度的變化以及GFAP、Cx43表達(dá)的影響，來(lái)探討星形膠質(zhì)細(xì)胞在大鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元損傷中的可能機(jī)制以及針刺干預(yù)的影響，以期為PD的針刺治療開(kāi)辟新的思路。
　　方法：將140只健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為正常

4、組、假手術(shù)組、模型組、電針組。正常組、假手術(shù)組各30只，模型組、電針組各40只。用微量注射法向大鼠右側(cè)紋狀體注射6-羥基多巴胺制備偏側(cè)PD大鼠旋轉(zhuǎn)模型,假手術(shù)組以生理鹽水替代6-羥基多巴胺進(jìn)行微量注射。正常組、模型組、假手術(shù)組不做任何治療；電針組在造模的基礎(chǔ)上電針“風(fēng)府”“太沖”穴，采用連續(xù)波，頻率2Hz，強(qiáng)度1mA,持續(xù)30min,一日一次，治療兩周。電針治療結(jié)束后，（1）用旋轉(zhuǎn)行為測(cè)試儀觀察大鼠的旋轉(zhuǎn)行為，（2）運(yùn)用免疫組化檢測(cè)損毀

5、側(cè)黑質(zhì)TH陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)目，（3）運(yùn)用HPLC熒光法檢測(cè)損毀側(cè)紋狀體Glu濃度，（4）采用RT-PCR法檢測(cè)大鼠損毀側(cè)紋狀體部GFAPmRNA、Cx43mRNA表達(dá)的變化，（5）采用western-blot法檢測(cè)損毀側(cè)紋狀體部GFAP、Cx43蛋白活性表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：（1）行為學(xué)觀察，與模型組比較，電針組旋轉(zhuǎn)行為明顯改善（P<0.01）。（2）與正常組、假手術(shù)組比較，模型組TH陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)目明顯減少（P<0.01）；與模

6、型組比較，電針組TH陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)目明顯增多（P<0.05）。（3）與正常組、假手術(shù)組比較，模型組Glu濃度顯著升高（P<0.01）；與模型組比較，電針組Glu濃度顯著降低（P<0.01）。（4）與正常組、假手術(shù)組比較，模型組GFAPmRNA、Cx43mRNA表達(dá)顯著升高（P<0.01），與模型組比較，電針組GFAPmRNA、Cx43mRNA表達(dá)顯著降低（P<0.01）。（5）與正常組、假手術(shù)組比較，模型組GFAP、Cx43蛋白表達(dá)顯著