紋狀體立體定向注射Taclo帕金森病大鼠模型的建立.pdf

1、研究背景：
　　三氯乙烯(Trichtoroethylene、TCE)是一種含氯有機物，具有脂溶性高、易混溶于有機物及水的物理特性，工業(yè)上被作為脫脂劑、萃取劑廣泛使用，醫(yī)學上也曾用作麻醉劑、流產劑及其它藥物的制備。2008年，美國肯塔基大學醫(yī)學院Guoying Bing與Don Gash教授在一項帕金森病臨床試驗中偶然發(fā)現(xiàn)，低濃度的三氯乙烯長期作用于人體可使其神經功能出現(xiàn)異常，表現(xiàn)為帕金森病綜合征癥狀，出現(xiàn)運動遲緩，協(xié)調性、穩(wěn)定性

2、差等神經功能退行性改變，部分發(fā)展成為典型的帕金森病(Parkinson's disease、PD)。隨后Guoying Bing教授通過對大鼠人工喂養(yǎng)TCE，成功的構建出帕金森病大鼠模型，并且在研究中發(fā)現(xiàn)了紋狀體黑質纖維變性和多巴胺能神經元破壞。動物體內TCE的代謝途徑可以分為兩種:細胞色素P450氧化途徑和谷胱甘肽結合途徑。1-三氯甲基-1，2，3，4-四氫化-β-咔啉(1-Trichloromethyl-1，2，3，4-Tetrah

3、ydro-Carboline，TaClo)是TCE盼體內代謝產物之一，可經氧化途徑在動物體內形成。由于Taclo與公認的可導致帕金森病的化合物1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶(MPTP)在化學結構方面有共同之處，因此我們考慮Taclo可能在TCE引起的帕金森病發(fā)病過程中扮演著重要的角色。
　　目的：觀察大鼠紋狀體立體定向注射Taclo對黑質內多巴胺神經元的損毀作用，構建帕金森病大鼠模型，為進一步研究Taclo的作用機制

4、奠定基礎。
　　方法：60只雄性Wistar大鼠被隨機的分為兩組，聚乙二醇(PEG)組和Taclo組，每組30只，使用腦立體定向儀分別將PEG及溶于PEG的Taclo注射到兩組大鼠右側紋狀體中。術后2周及1月以阿撲嗎啡誘導大鼠旋轉，用自動視頻追蹤系統(tǒng)記錄30min內大鼠運動軌跡。術后1個月處死大鼠，行酪氨酸羥化酶(TH)免疫組化染色、高效液相色譜分析及Western-blotting蛋白測定。
　　結果：阿撲嗎啡誘導后，Ta

5、clo組可見24只大鼠出現(xiàn)恒定向左側旋轉的行為學表現(xiàn)，并且旋轉的速度大于210r/30min，自動視頻追蹤系統(tǒng)記錄大鼠30min運動軌跡發(fā)現(xiàn)大鼠運動軌跡稀疏，免疫組化顯示PD大鼠右側黑質多巴胺神經元數(shù)量比左側及PEG組兩側明顯減少(P＜0.05)，高效液相色譜分析顯示PD大鼠右側紋狀體區(qū)多巴胺含量明顯減少(P＜0.05)，Western-blotting結果顯示PD大鼠右側黑質區(qū)capase-3及cox-2表達明顯增加(P＜0.05)。