血清法制備板層組織工程角膜的實驗研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文血清法制備板層組織工程角膜的實驗研究姓名：邵毅申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：劉祖國20100420脫細(xì)胞效果徹底且能完整保留組織結(jié)構(gòu)的方法，并將此法制備的組織工程角膜進(jìn)行了各項組織學(xué)( 光鏡／電鏡／免疫熒光等) 、生物化學(xué)、生物力學(xué)等檢測以篩選出最佳的制備方法，繼之通過細(xì)胞毒性、組織相容性及生物安全性的檢測確定其作為組織工程角膜載體材料的可行性，初步行板層角膜移植手術(shù)修補兔角膜基質(zhì)缺損，發(fā)現(xiàn)效果顯著，這為板

2、層組織工程角膜臨床應(yīng)用提供可靠的實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)。第1 部分a - g a l 在不同種動物眼表組織的表達(dá)和分布目的：探討0 【．G a l 基因在不同物種、不同種屬和不同發(fā)育階段的動物眼表組織的表達(dá)和分布。方法：使用相機和裂隙觀察動物眼部大體情況，使用蘇木素與伊紅和G S I B 4 對各種動物眼睛切片進(jìn)行染色。結(jié)果：照片和裂隙燈觀察顯示，蘇木精和伊紅染色顯示備用角膜透明和組織結(jié)構(gòu)完整。G S I B 4 凝集素在無脊椎動物眼表組織

3、( 河蝦、龍蝦、章魚) 和脊椎動物眼表組織( 皖魚、青蛙、牛蛙、蜥蜴、龜、鱉、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、豬、山羊、綿羊、黃牛、肉牛)等物種均有不同程度的表達(dá)。而在鳥類( 鵪鶉、雞、鴨、鵝) ，魚類( 金魚和鯛魚) 和哺乳動物( 恒河猴和人類) 等未見有染色。結(jié)論這項研究為角／結(jié)／鞏膜異種動物移植模型選擇( 高危和免疫赦免模型) 及角膜替代材料選擇提供了參考依據(jù)，缺少i f , ．G a l 的角膜基質(zhì)，包括鳥類、魚類表示及部分哺乳動物，可

4、作為移植材料用于眼表異種移植，而高表達(dá)a ．G a l 的角膜基質(zhì)則可能通過抗原排斥反應(yīng)去除基質(zhì)細(xì)胞，為篩選出合適的角膜支架奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞： 動物，眼表，異種器官移植，a ．G a l ，組織工程第2 部分血清法制備板層組織工程角膜的實驗研究目的：篩選并制備脫細(xì)胞豬角膜基質(zhì)的最佳方法并檢測其生物學(xué)性能，評價異種脫細(xì)胞角膜基質(zhì)的細(xì)胞毒性及組織相容性，探討采用脫細(xì)胞豬角膜基質(zhì)修補角膜基質(zhì)缺損的可行性和安全性，為板層組織工程角膜的構(gòu)建提供理