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文檔簡介
1、目的:初步探討糖皮質(zhì)激素誘導的亮氨酸拉鏈蛋白(GILZ)在炎癥反應過程中的作用機理。 方法:用無血清培養(yǎng)基分兩組培養(yǎng)人單核細胞系THP-1細胞,其中一組加入地塞米松刺激,12小時后提取兩組細胞總RNA和總蛋白,運用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法在轉(zhuǎn)錄水平檢測GILZ基因;運用蛋白質(zhì)印跡(Westernblotting)方法在翻譯水平檢測轉(zhuǎn)錄因子NF-κB與AP-1的表達。收集10例臨床創(chuàng)傷患者傷后24小時內(nèi)的外周
2、血,提取白細胞后分兩組給予無血清培養(yǎng)基,并在其中一組加入地塞米松刺激,培養(yǎng)12小時后提取白細胞總RNA和總蛋白,運用半定量RT-PCR方法在轉(zhuǎn)錄水平檢測GILZ基因;運用Westernblotting方法在翻譯水平檢測NF-κB與AP-1的表達。 結(jié)果:在地塞米松刺激下,刺激組THP-1細胞和創(chuàng)傷患者外周血白細胞的GILZmRNA表達水平比對照組升高(P<0.01);刺激組的NF-κB與AP-1蛋白表達水平低于對照組(P<0.0
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