針刺對血管性癡呆大鼠海馬Ref-1上下游調(diào)控分子的影響.pdf

1、目的：觀察針刺對血管性癡呆大鼠海馬Ref-1上下游調(diào)控分子的影響，探討針刺Ref-1信號通路的抗氧化機制。
　　方法：Wistar大鼠82只，隨機分為假手術(shù)組、模型組、針刺組和非穴組。選擇雙側(cè)頸總動脈阻斷法復(fù)制血管性癡呆大鼠模型，造模后第3天針刺，針刺組選取百會穴和雙側(cè)足三里穴行捻轉(zhuǎn)補法各30s。非穴組選取雙側(cè)肋下兩個固定非穴點（肋下髂嵴上10 mm、15mm），作為對照刺激點，采用平補平瀉的捻轉(zhuǎn)手法刺激各30s。每日針刺1次，治

2、療6天，休息1天，2周共治療12次。假手術(shù)組和模型組進(jìn)行與針刺組和非穴組相同時間、相同程度的捉抓刺激。針刺治療結(jié)束后，采用Western blotting技術(shù)檢測各組大鼠海馬磷酸化CKⅡ蛋白表達(dá)水平；采用凝膠遷移（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）方法檢測各組大鼠海馬AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性；采用免疫組化技術(shù)檢測各組大鼠海馬HIF-1α蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果：（1）與

3、假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬磷酸化CKⅡ水平顯著下降（P<0.05）；與模型組比較，針刺組和非穴組大鼠海馬磷酸化CKⅡ水平顯著升高（P<0.05）；與非穴組相比，針刺組大鼠海馬磷酸化CKⅡ水平顯著升高（P<0.05）；（2）與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性顯著升高（P<0.05)；與模型組相比，針刺組和非穴組大鼠海馬AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性顯著降低（P<0.05）；與非穴組相比，針刺組大鼠海

4、馬AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性顯著降低（P<0.05）；（3）與假手術(shù)組比較，模型組海馬HIF-1α蛋白表達(dá)水平顯著升高（P<0.05）；與模型組比較，針刺組和非穴組海馬HIF-1α蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）；與非穴組相比，針刺組海馬HIF-1α蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）。
　　結(jié)論:針刺通過提高海馬Ref-1上游CKⅡ的磷酸化表達(dá)水平，降低海馬Ref-1下游AP-1和NF-κB的DNA結(jié)合活性和HIF