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文檔簡介
1、第一部分、非動(dòng)情期自體移植法子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型的建立
目的:用自體子宮內(nèi)膜移植法構(gòu)建子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型,為進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。
方法:健康雌性未孕SD大鼠48只,周齡8~10周,體重200~250g。參考Vernon等的方法進(jìn)行自體子宮內(nèi)膜移植。建模后3周進(jìn)行第二次剖腹探查,觀察子宮內(nèi)膜種植生長情況和組織形態(tài)學(xué)變化。移植灶體積增大,呈透明結(jié)節(jié)狀或囊狀,內(nèi)有淡黃色透明囊液積聚者視為造模成功。
2、 結(jié)果:共做48只SD大鼠模型,有40例大鼠在移植處可見透明小囊腫,表面有血管形成。SD大鼠的內(nèi)異癥模型成模率為83.33%(40/48),有4例大鼠沒有成模,考慮在取內(nèi)膜片段時(shí)內(nèi)膜面積太小或內(nèi)膜與漿肌層分離不夠有關(guān),有2例大鼠死于麻醉意外,還有2例死于腹腔膿腫。其中有10例大鼠異位病灶處腹膜與大網(wǎng)膜粘連,有8例大鼠異位病灶與腸管粘連,余內(nèi)異癥病灶結(jié)構(gòu)清晰,與周圍組織無粘連。
結(jié)論:非動(dòng)情期自體子宮內(nèi)膜移植法建立子宮內(nèi)
3、膜異位癥大鼠模型是可行的。旨在通過這種建模方法建立理想的子宮內(nèi)膜異位癥動(dòng)物模型,為臨床治療子宮內(nèi)膜異位癥提供實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?br> 第二部分、來氟米特治療子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究
目的:初步探討來氟米特對(duì)EMT大鼠模型異位灶中MAPK及NF-κ B的影響,采用酶聯(lián)免疫法(enzyme-linked immnuno sorbent assay,ELISA)測(cè)定大鼠血清中IL-1β的含量,同時(shí)觀察其對(duì)EMT大鼠異位灶
4、體積的抑制作用及對(duì)異位內(nèi)膜病理形態(tài)學(xué)的影響,并對(duì)其可能的機(jī)制進(jìn)行探討。進(jìn)一步證實(shí)免疫調(diào)節(jié)劑治療子宮內(nèi)膜異位癥是可行的,為子宮內(nèi)膜異位癥的臨床治療提供新的治療策略和靶點(diǎn)以及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
1.模型建立3周后,首先抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的尾靜脈血,用ELISA法檢測(cè)血清中IL-1β的水平;接著剖腹觀察異位子宮內(nèi)膜的生長情況,測(cè)量移植內(nèi)膜病灶的大小,根據(jù)公式體積V=0.52×長×寬×高,計(jì)算體積V1,同時(shí)把造模成功的40
5、只大鼠隨機(jī)分為2組:LEF組(n=20):給予來氟米特35mg/kg/d灌胃,每天同一時(shí)間給藥,連續(xù)用藥3周;模型對(duì)照組(n=20):給予生理鹽水1ml/kg/d灌胃,每天同一時(shí)間給藥,連續(xù)用藥3周;給藥期間觀察大鼠的活動(dòng)、飲食、排便、及體重變化等情況。
2.喂藥3周后,再次抽取實(shí)驗(yàn)大鼠的尾靜脈血,并剖腹觀察大鼠移植內(nèi)膜病灶的生長情況并測(cè)量異位內(nèi)膜病灶的體積V2,收集移植內(nèi)膜病灶后處死大鼠:(1)V2與V1進(jìn)行比較;(2)
6、用免疫組化檢測(cè)大鼠模型異位灶MAPK及NF-κ B的含量;(3)采用ELISA測(cè)定大鼠血清中IL-1β的含量;(4)比較各組大鼠治療前后的體重。
結(jié)果:
1.移植模型復(fù)制成功,造模成功率83.33%。移植灶體積增大,呈透明結(jié)節(jié)狀或囊狀,內(nèi)有淡黃色透明囊液積聚。
2.用藥后LEF組移植內(nèi)膜病灶體積(54.18±17.67)小于模型對(duì)照組(98.03±9.74),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。<
7、br> 3.用藥后LEF組中大鼠移植內(nèi)膜病灶中MAPK和NF-κB免疫組化平均積分光密度值均較模型對(duì)照組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
4.用藥后LEF組血清IL-1β含量明低于模型對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);用藥后LEF組血清IL-1β含量明低于用藥前,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
5.用藥后LEF組大鼠行為活躍,毛發(fā)光澤度及飲食方面與模型對(duì)照組相比均無明顯改變。且兩組大鼠
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