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文檔簡介
1、子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis,EMs)主要是具有組織學(xué)活性的子宮內(nèi)膜生長在子宮腔外,雖然是一種良性疾病,但是異位的子宮內(nèi)膜腺體的增生和間質(zhì)纖維化,使其往往具有類似惡性疾病的生長、浸潤及播散過程,因此異位的子宮內(nèi)膜組織可以侵及盆腔內(nèi)外乃至全身各個部位。通??梢鸶鞣N各樣的疼痛、疲勞、不孕等癥狀。目前的治療主要是手術(shù)及藥物治療,藥物治療主要是以性激素抑制為主的治療,通過藥物的調(diào)節(jié),造成體內(nèi)低雌激素水平,從而使異位的子宮內(nèi)膜組織
2、失去活性。關(guān)于子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病原因眾說紛紜,近年來,越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫因素在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用,因此在子宮內(nèi)膜異位癥的藥物治療方面,免疫系統(tǒng)藥物越來越受到重視。
目的:
本實驗通過觀察免疫調(diào)節(jié)抑制劑來氟米特(Leflunomide,LEF)對子宮內(nèi)膜異位癥SD(Sprague-Dawley)大鼠模型進(jìn)行干預(yù),肉眼觀察大鼠模型內(nèi)膜病灶的影響,檢測模型大鼠血清中細(xì)胞間黏附分子-1(Inter
3、cellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)及組織中調(diào)節(jié)激活正常細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(Regulatedonactivation,normalTcellexpressedandsecreted,RANTES)和白介素-8(Interleuki-8,IL-8)的表達(dá)情況,探討LEF在子宮內(nèi)膜異位癥的病變發(fā)展過程中可能發(fā)揮的作用,從免疫學(xué)角度分析其可能的作用機(jī)理,為來氟米特的臨床應(yīng)用提供進(jìn)一步的實驗基礎(chǔ)。
4、 方法:
1.隨機(jī)選取健康未交配過的SD雌性大鼠50只,8-9周齡,(200+20)g,從中隨機(jī)選取35只運用改良的自體移植法建立子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型,剩余15只作為空白對照組。
2.建立模型4周后,無菌操作下剖腹探查,肉眼觀察移植內(nèi)膜病灶的大體情況,游標(biāo)卡尺測量異位內(nèi)膜病灶的大小,計算體積V1,并取部分移植內(nèi)膜病灶,常規(guī)脫水后石蠟包埋行病理組織學(xué)檢查,同時把造模成功的32只大鼠隨機(jī)分為兩組:來氟米特治療組(n=
5、16)和實驗對照組(n=16),LEF治療組灌胃給予來氟米特35mg/kg,空白對照組和實驗對照組均灌服等容量生理鹽水3ml/kg,每天保證同一時間,三組大鼠分別灌胃處理,治療持續(xù)4周。給藥前分別抽取三組大鼠尾靜脈血1ml,運用流式細(xì)胞術(shù)檢測三組大鼠血清中ICAM-1表達(dá)率。
3.三組大鼠灌胃處理4周后,再次分別抽取三組大鼠尾靜脈血1ml,流式細(xì)胞術(shù)檢測三組血清中ICAM-1的表達(dá)情況。第3次剖腹測量LEF治療組和實驗對照組異
6、位子宮內(nèi)膜的體積V2,切除兩組大鼠部分異位內(nèi)膜病灶組織,免疫組化法檢測用藥后兩組大鼠異位病灶中RANTES和IL-8的蛋白表達(dá)情況。給藥前后定期稱量三組大鼠的體重,并觀察三組大鼠精神狀態(tài)、進(jìn)食量有無明顯改變及排便是否如常。
4.所有實驗數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計學(xué)SPSS18統(tǒng)計軟件,數(shù)據(jù)格式均用x±s表示,組間計量資料比較采用t檢驗,計數(shù)資料用?2檢驗。檢驗水準(zhǔn)均α=0.05。
結(jié)果:
1.通過采用自體移植法,可建立
7、子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型,造模成功率91%(32/36)。
2.用藥后LEF治療組移植內(nèi)膜病灶大小明顯小于實驗對照組(P<0.05),明顯小于用藥前(P<0.05)。
3.用藥后,LEF治療組中大鼠移植內(nèi)膜病灶組織中RANTES和IL-8表達(dá)均較實驗對照組低(P<0.05)。
4.用藥前LEF治療組和實驗對照組血清中ICAM-1含量明顯高于空白對照組(P<0.05);用藥后LEF治療組血清ICAM-1含量明顯
8、低于實驗對照組;用藥后LEF治療組血清ICAM-1含量明顯低于用藥前(P<0.05)。
5.LEF組實驗大鼠第7天開始出現(xiàn)活動量稍減少,進(jìn)食、進(jìn)水量有所減少,精神差,但LEF組喂藥以來總的體重與其它兩組無明顯變化(P>0.05)。
結(jié)論:
LEF治療后大鼠血清ICAM-1及病灶中RANTES和IL-8的含量均明顯降低,推測來氟米特可通過降低相關(guān)細(xì)胞因子的水平,對子宮內(nèi)膜異位癥的演變可能有一定程度的抑制行為,
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