新基因MXRA7的組織學(xué)表達(dá)及功能研究.pdf

1、目的：
　　基質(zhì)重建相關(guān)分子7（MXRA7），是經(jīng)生物信息學(xué)預(yù)測存在的基因，已有越來越多的生物信息學(xué)資料如高通量數(shù)據(jù)證實該基因的存在，但目前對其生物學(xué)功能還知之甚少。本課題組應(yīng)用全基因組表達(dá)芯片技術(shù)，在研究小鼠角膜炎性損傷后新生血管的病理過程中差異表達(dá)基因時，捕捉到了MXRA7基因的變化。本研究擬在生物信息學(xué)預(yù)測分析和前期實驗數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，探究MXRA7基因在小鼠不同組織的表達(dá)分布及生物學(xué)功能。
　　方法：
　　運用現(xiàn)

2、有數(shù)據(jù)庫資源，用生物信息學(xué)方法分析MXRA7基因在小鼠不同組織的表達(dá)與生物學(xué)功能。引進(jìn)構(gòu)建MXRA7基因缺陷小鼠，研究正常野生型小鼠與缺陷小鼠之間的生理學(xué)差異。應(yīng)用熒光實時定量PCR技術(shù)（RT-qPCR）檢測MXRA7基因在不同組織中mRNA的表達(dá)水平。根據(jù)基因的組織表達(dá)分布及可能的預(yù)測功能，在MXRA7基因野生型與缺陷型小鼠建立不同的疾病模型：耳洞損傷修復(fù)模型，Matrigel新生血管模型及主動脈內(nèi)皮細(xì)胞體外誘導(dǎo)成毛細(xì)血管網(wǎng)腔模型。<

3、br>　　結(jié)果：
　　成功繁育可穩(wěn)定遺傳的MXRA7基因缺陷小鼠。RT-qPCR檢測顯示該基因mRNA在小鼠各主要組織或器官中廣泛表達(dá)，表達(dá)水平最高的依次為眼睛、肺、腦，表達(dá)最低是骨髓。耳洞損傷修復(fù)實驗發(fā)現(xiàn)，MXRA7基因缺陷鼠耳洞愈合程度明顯低于野生型鼠，且在耳洞損傷后第13、26、32天的耳洞面積有差異，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）；損傷愈合組織經(jīng)HE染色后統(tǒng)計分析，兩組小鼠的組織橫截面積相近或無明顯差異；Masson染色

4、分析，缺陷型小鼠耳洞愈合組織結(jié)締組織較野生型致密，愈合組織血管分析顯示野生型小鼠微血管密度高于缺陷型。Matrigel膠體內(nèi)成毛細(xì)血管實驗顯示，野生型組小鼠Matrigel膠體內(nèi)血管密度、紅細(xì)胞數(shù)量明顯高于缺陷鼠組。主動脈內(nèi)皮細(xì)胞體外誘導(dǎo)成毛細(xì)血管網(wǎng)腔實驗證明，MXRA7野生型小鼠內(nèi)皮細(xì)胞成管能力優(yōu)于缺陷型。
　　結(jié)論：
　　實驗研究發(fā)現(xiàn)MXRA7基因在機體廣泛表達(dá)，MXRA7基因在損傷修復(fù)等胞外基質(zhì)重建系統(tǒng)中發(fā)揮一定的功能