人淚液蛋白質(zhì)組份變化與干眼癥的相關(guān)性研究.pdf

1、目的： 1.分析干眼癥患者與對照組的干眼癥狀與臨床體征的特點(diǎn)，研究干眼癥患者主觀癥狀與客觀體征以及臨床檢查的相關(guān)性。 2.利用先進(jìn)的iTRAQ聯(lián)合二維納米液相色譜——納米電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，研究淚液蛋白質(zhì)組份變化與干眼癥的相關(guān)性。 方法： 1.隨機(jī)選取2007年12月至2008年8月就診于本院門診的患者243例（486眼），通過檢查，包括視力、淚膜干涉儀檢查，淚液分泌試驗(yàn)（SchirmertestⅠ，SⅠ

2、 t），干眼問卷調(diào)查（dry eye questionnaire，DEQ），15分鐘后用裂隙燈檢查眼前節(jié)，淚膜破裂時(shí)間（break-up time，BUT），以及熒光素（Fluorescein，F(xiàn)L）染色檢查。共采集干眼癥患者126例（252眼），對照組117例（234眼）資料進(jìn)行相關(guān)分析研究。 2.隨機(jī)抽取其中干眼癥患者12例（12眼），對照組18例（18眼），應(yīng)用iTRAQ聯(lián)合二維納米液相色譜——納米電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)檢測S

3、chirmer試紙采集到的淚液蛋白質(zhì)。為驗(yàn)證iTRAQ的檢查結(jié)果，另選兩組樣本，8例（8眼）干眼癥患者以及8例（8眼）對照組，ELISA技術(shù)分別檢測這兩組Schirmer試紙采集到的α-enolase和S100A4蛋白的濃度。 結(jié)果： 1.干眼組中老年人及女性較對照組多。 2.干眼癥患者最常見的癥狀是干澀、其次是視疲勞和視力波動(dòng)。 3.干眼組與對照組相比，干澀、異物感、視疲勞、眼痛、眼紅、視力波動(dòng)、畏光、

4、眼皮沉重感、癢和不適癥狀在兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.干眼組與對照組相比，結(jié)膜松弛、瞼板腺功能和淚膜碎屑狀況的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。淚膜干涉圖像、SⅠ t試驗(yàn)、BUT、FL眼表染色在這兩組間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5.干眼癥患者的癥狀與年齡、性別、臨床體征和臨床檢查的相關(guān)性： 1）眼皮沉重與性別有相關(guān)性，其余11種癥狀均與性別無相關(guān)性。 2）異物感和視力波動(dòng)與年齡呈正相關(guān)，分泌物增多與年齡呈顯著性負(fù)相關(guān)，其

5、余9種癥狀與年齡均無相關(guān)性。 3）分泌物增多與SⅠ t值呈正相關(guān)，流淚與SⅠ t值呈顯著性正相關(guān)，其余10種癥狀與SⅠ t值均無相關(guān)性。 4）眼痛或眼脹與BUT呈負(fù)相關(guān)。其余11種癥狀與BUT值均無相關(guān)性。 5）眼紅與FL眼表染色情況呈正相關(guān)，異物感與FL眼表染色情況呈顯著性正相關(guān)，其余10種癥狀與FL眼表染色情況均無相關(guān)性。 6）12種癥狀與淚膜干涉圖像均無相關(guān)性。 7）畏光與瞼板腺功能不全呈正

6、相關(guān)，而干澀和視力波動(dòng)癥狀與瞼板腺功能呈顯著性正相關(guān)，其余9種癥狀與瞼板腺功能不全均無相關(guān)性。 8）異物感與結(jié)膜松弛狀況呈正相關(guān)，其余11種癥狀均與結(jié)膜松弛無相關(guān)性。 6.利用二維納米液相色譜-納米電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，共檢測出淚液蛋白質(zhì)93種。 7.利用iTRAQ比率鑒定干眼組患者淚液與對照組淚液的差異蛋白，其中有11種蛋白在干眼組與對照組間有明顯差異，8種上調(diào)，3種下調(diào)。 8.應(yīng)用ELISA技術(shù)證實(shí)α-

7、enolase（t-test，p<0.038）和S100 A4（t-test，p<0.027）在干眼癥患者Schirmer試紙采集到的淚液中的濃度明顯高于對照組。 結(jié)論： 1.結(jié)膜松弛、瞼板腺功能不全、淚膜碎屑、SⅠ t、BUT、FL眼表著色、淚膜干涉圖像是診斷干眼癥的重要依據(jù)。 2.干眼癥狀與體征的相關(guān)性較差。 3.干眼癥患者與對照組間的淚液蛋白質(zhì)有明顯差異，提示炎癥、眼表細(xì)胞凋亡、化生在干眼癥發(fā)生、發(fā)