甜菜生殖相關(guān)基因的克隆.pdf

1、高等植物生活史是有性世代與無性世代更迭出現(xiàn)的生殖方式。植物的早期胚胎發(fā)育是伴隨著細(xì)胞分裂而進(jìn)行的，所涉及的重要生物學(xué)過程包括合子激活、極性建立、形態(tài)建成、和器官發(fā)生等。 植物胚胎發(fā)育是非常復(fù)雜的，不是由單一基因單獨(dú)作用的，而是由多基因控制的過程。緒論部分中按植物胚胎發(fā)生的各個(gè)時(shí)期對(duì)這些基因及其表達(dá)特點(diǎn)作了詳細(xì)綜述。 本實(shí)驗(yàn)是以甜菜(Beta vulgaris)M14品系為材料，克隆與生殖發(fā)育有重要關(guān)系的基因。我們選擇甜菜

2、作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象不僅僅因?yàn)樘鸩嗽谖覈?guó)廣泛栽培，具有可觀的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，更重要的是人們?cè)谔鸩说拈L(zhǎng)期培育過程中獲得了若干寶貴的亞種，積累了大量遺傳信息。我們選擇的M14品系在細(xì)胞胚胎學(xué)和遺傳學(xué)特征上具有鮮明的無融合生殖現(xiàn)象。 本研究通過采用同源克隆及cDNA末端快速擴(kuò)增(RACE)的方法，根據(jù)現(xiàn)有其他物種的MARB，CK2基因的同源序列，設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物，應(yīng)用3'RACE擴(kuò)增出cDNA的3'端序列，通過5'RACE擴(kuò)增5’端序列，得到了甜菜CK

3、2完整的編碼序列為1002bp，編碼333個(gè)氨基酸。同源比對(duì)表明，甜菜CK2與水稻CK2同源性為61.05％，與玉米CK2的同源性為61.07％，與擬南芥CK2的同源性為62.07％，與煙草CK2的同源性為64.22％，與百合CK2的同源性為65.18％。MARB完整的編碼序列為1719bp，編碼572個(gè)氨基酸。同源比對(duì)表明，甜菜MARB與擬南芥MARB的同源性為57.19％，與番茄MARB的同源性為61.26％，與煙草MARB的同源性