單抗洗脫性血管內(nèi)支架體外釋放檢測裝置的制備與初步應(yīng)用.pdf

1、自從經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動脈成形術(shù)(PTCA)出現(xiàn)之后，血管內(nèi)支架在治療梗塞性冠狀動脈疾病方面，一直是主要的發(fā)展方向之一。其中藥物洗脫性支架的開發(fā)是一個熱點，它是將支架作為媒介提供延時的，并且足夠量的藥物釋放，通過藥物的作用來抑制支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生，因此藥物釋放特性的評估是藥物洗脫支架研究的重中之重。本文利用自制藥物洗脫支架體外釋放檢測裝置，以國內(nèi)自主研發(fā)的抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)單克隆抗體為目標(biāo)藥物制備單抗洗脫性血管內(nèi)支架

2、，初步評估了單抗洗脫支架的體外藥物緩釋特性和藥物分布狀況。
　　 首先，設(shè)計并實現(xiàn)了單抗洗脫性血管內(nèi)支架體外釋放檢測裝置，并對其進行了改進。該實驗裝置包括動力部分、載支架部分、溫度控制部分和循環(huán)通路部分，改進型裝置在此基礎(chǔ)上新增了載氣部分和壓力控制部分。其中動力部分為蠕動泵；載支架部分為玻璃流動腔，改進后可接入動脈血管；溫度控制部分為水浴鍋，后改進為人工氣候箱；循環(huán)通路部分由硅膠軟管、儲液瓶以及沈脫緩沖液組成；載氣部分包括氧氣瓶

3、、壓力表和流量儀；壓力控制部分為膜盒壓力儀。
　　 然后，利用前期體外釋放檢測裝置，對單抗洗脫血管內(nèi)支架進行了體外藥物緩釋實驗研究。聚乳酸涂層支架浸泡在經(jīng)125Ⅰ放射性標(biāo)記的GPⅡb/Ⅲa單抗溶液中制備單抗洗脫性血管內(nèi)支架，測定支架的載藥量。同時，利用前期體外釋放檢測裝置，對單抗洗脫性支架進行了體外洗脫實驗，測定了緩釋時間，評價了緩沖液的流量等相關(guān)因素對緩釋的影響。
　　 最后，利用改進型體外釋放檢測裝置，對單抗洗脫血管

4、內(nèi)支架進行了體外藥物分布實驗研究。聚乳酸涂層支架浸泡在經(jīng)FITC熒光標(biāo)記的GPⅡb/Ⅲa單抗溶液中制備單抗洗脫性血管內(nèi)支架，熒光顯微鏡拍照定性評價熒光標(biāo)記的效果。檢測動脈血管于改進型體外釋放檢測裝置中保持組織活性的最長時間，以確立體外實驗的最佳時間。以此為基礎(chǔ)，利用改進型體外釋放檢測裝置，評估了不同時間點的藥物在動脈血管和血管支架上的分布情況。
　　 實驗結(jié)果表明，本文設(shè)計的單抗洗脫支架體外釋放檢測裝置取樣方便，結(jié)合放射性檢測方

5、法和免疫熒光檢測方法，結(jié)果準(zhǔn)確，穩(wěn)定性良好，基本滿足了實驗需求。支架的吸附和洗脫實驗顯示了支架的載藥和釋藥特性，支架的載藥量一般可達到幾十微克；支架的藥物釋放時間可達到2個星期，緩沖液的流量對藥物的釋放有一定的影響。單抗的熒光標(biāo)記實驗結(jié)果顯示單抗在支架上分布均勻，證明了Chadwick熒光標(biāo)記法的可行；單抗洗脫支架的體外分布實驗顯示動脈血管在8h內(nèi)可以在改進型體外釋放檢測裝置中保持組織活性，單抗洗脫支架體外植入后8h內(nèi)支架上藥物未見明顯