補(bǔ)肺益腎方聯(lián)合舒肺貼對COPD大鼠免疫球蛋白及T淋巴細(xì)胞亞群的影響.pdf

1、目的：
　　1、基于慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）穩(wěn)定期大鼠模型，從肺功能、肺組織病理方面評價(jià)補(bǔ)肺益腎方聯(lián)合舒肺貼的療效。
　　2、觀察補(bǔ)肺益腎方聯(lián)合舒肺貼對COPD穩(wěn)定期大鼠模型外周血、支氣管肺泡灌洗液（broncho alveolar lavage fluid，BALF）中免疫球蛋白及T淋巴細(xì)胞亞群的影響。
　　方法：
　　SPF級SD

2、大鼠72只隨機(jī)分為空白組（CG）、模型組（MG）、穴位貼敷組（ASG）、補(bǔ)肺益腎組（BYG）、補(bǔ)肺益腎聯(lián)合穴位貼敷組（BY+ASG，簡稱聯(lián)合組）、氨茶堿組（AG），每組12只。采用香煙熏吸聯(lián)合細(xì)菌反復(fù)感染的方法制備COPD穩(wěn)定期大鼠模型。自第9周第1天，空白組和模型組以生理鹽水灌胃聯(lián)合模擬穴位貼敷；穴位貼敷組以生理鹽水灌胃聯(lián)合舒肺貼穴位貼敷；補(bǔ)肺益腎組以補(bǔ)肺益腎方灌胃聯(lián)合模擬穴位貼敷；補(bǔ)肺益腎聯(lián)合穴位貼敷組以補(bǔ)肺益腎方灌胃聯(lián)合舒肺貼穴位

3、貼敷；氨茶堿組以氨茶堿灌胃聯(lián)合模擬穴位貼敷，給藥至第20周結(jié)束后取材。采用非束縛全身體積描記系統(tǒng)（whole body plethysmography，WBP）每月檢測大鼠肺功能，包括潮氣量（tidal volume，TV）、呼氣峰流速（peak expiratory flow，PEF）、50％潮氣量呼氣流量（50%tidal volume expiratory flow，EF50）。采用HE染色法觀察肺組織病理。采用免疫比濁法檢測大鼠

4、血清及BALF中IgG、IgA、IgM水平；采用流式細(xì)胞術(shù)（flow cytometry，F(xiàn)CM）檢測大鼠外周血及BALF中T淋巴細(xì)胞亞群水平。
　　結(jié)果：
　　1、一般情況
　　第4周開始，模型大鼠皮毛逐漸枯黃無光澤，精神萎靡，倦怠少動(dòng)，呼吸淺促，進(jìn)食飲水量減少。第9周用藥后，上述癥狀逐漸減輕，以補(bǔ)肺益腎組和聯(lián)合組尤為顯著。第0周時(shí)，各組大鼠體重具有可比性（P>0.05）。第8周時(shí)，各組大鼠體重較空白組均有降低趨勢（

5、P>0.05）；模型組大鼠體重增長較空白組明顯降低（P<0.01）。第20周時(shí)，模型組大鼠體重、第8-20周體重增長均較空白組明顯降低（P<0.01）；各治療組大鼠體重、第8-20周體重增長均較模型組升高（P<0.01），但各治療組之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　2、肺功能
　　第4周起，模型組PEF、EF50均較空白組明顯降低（P<0.01，P<0.05）。第8周起，模型組TV較空白組明顯降低（P<0.01）。

6、與模型組相比，第16周，穴位貼敷組、補(bǔ)肺益腎組、聯(lián)合組、氨茶堿組TV均明顯升高（P<0.01，P<0.05），補(bǔ)肺益腎組、聯(lián)合組EF50升高（P<0.01，P<0.05）；第20周，補(bǔ)肺益腎組和聯(lián)合組TV、PEF、EF50均升高（P<0.01，P<0.05），穴位貼敷組EF50升高（P<0.05），氨茶堿組TV升高（P<0.05）。
　　3、肺組織病理
　　空白組大鼠肺組織、氣道結(jié)構(gòu)完整。模型組肺組織可見肺泡壁斷裂融合、肺泡

7、腔擴(kuò)大、炎癥細(xì)胞浸潤、肺氣腫征象明顯。穴位貼敷組、補(bǔ)肺益腎組、聯(lián)合組及氨茶堿組上述病理改變均不同程度改善，其中補(bǔ)肺益腎組和聯(lián)合組在改善肺泡和氣管壁結(jié)構(gòu)方面略顯優(yōu)勢。
　　4、血清中IgA、IgG、IgM水平
　　模型組IgA、IgG、IgM水平較空白組明顯降低（P<0.01）。與模型組相比，穴位貼敷組、補(bǔ)肺益腎組、聯(lián)合組、氨茶堿組IgA、IgG、IgM水平升高（P<0.05，P<0.01）。與氨茶堿組相比，補(bǔ)肺益腎組IgG、

8、聯(lián)合組IgA、IgG升高（P<0.05，P<0.01）。與穴位貼敷組相比，聯(lián)合組 IgA、IgG較升高（P<0.05，P<0.01）。與補(bǔ)肺益腎組相比，聯(lián)合組IgG明顯升高（P<0.01）。
　　5、BALF中sIgA、IgG、IgM水平
　　模型組sIgA、IgG、IgM水平較空白組明顯降低（P<0.01）。與模型組相比，各治療組 sIgA、IgG水平明顯升高（P<0.01）；補(bǔ)肺益腎組、聯(lián)合組 IgM水平升高（P<0.0

9、5，P<0.01）。與氨茶堿組相比，聯(lián)合組sIgA、IgG升高（P<0.05，P<0.01）。與穴位貼敷組相比，聯(lián)合組sIgA、IgG升高（P<0.05，P<0.01）。與補(bǔ)肺益腎組相比，聯(lián)合組IgG顯著升高（P<0.01）。
　　6、外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化
　　模型組外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較空白組明顯降低（P<0.01），CD8+水平明顯升高（P<0.01）。與模型組相比，穴位貼敷組、補(bǔ)肺益

10、腎組、聯(lián)合組和氨茶堿組 CD4+/CD8+水平升高（P<0.05，P<0.01），CD8+水平明顯降低（P<0.01）；補(bǔ)肺益腎組、聯(lián)合組CD4+水平明顯升高（P<0.01）；聯(lián)合組CD3+水平升高（P<0.05）。與氨茶堿組相比，補(bǔ)肺益腎組 CD4+、CD4+/CD8+水平升高（P<0.05）；聯(lián)合組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平升高（P<0.05，P<0.01），CD8+水平降低（P<0.05）。與穴位貼敷組相比，聯(lián)合組

11、 CD4+、CD4+/CD8+水平升高（P<0.05，P<0.01），CD8+水平降低（P<0.05）。
　　7、BALF中T淋巴細(xì)胞亞群的變化
　　模型組BALF中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較空白組明顯降低（P<0.01），CD8+水平明顯升高（P<0.01）。與模型組比較，穴位貼敷組、補(bǔ)肺益腎組、聯(lián)合組和氨茶堿組 CD4+、CD4+/CD8+水平明顯升高（P<0.01），CD8+水平降低（P<0.01，P

12、<0.05）；補(bǔ)肺益腎組和聯(lián)合組 CD3+明顯升高（P<0.01）。與氨茶堿組相比，補(bǔ)肺益腎組CD4+、CD4+/CD8+水平升高（P<0.05）；聯(lián)合組CD4+、CD4+/CD8+水平升高（P<0.05，P<0.01），CD8+水平下降（P<0.05）。與穴位貼敷組相比，聯(lián)合組 CD4+、CD4+/CD8+水平升高（P<0.01，P<0.05），CD8+水平下降（P<0.05）。聯(lián)合組CD4+、CD4+/CD8+水平較補(bǔ)肺益腎組升高（