缺血缺氧致新生大鼠PVL及OLIG1對(duì)少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘化的影響.pdf

1、目的：
　　腦室周圍白質(zhì)軟化(Periventricular Leuko-malacia，PVL)是早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的最嚴(yán)重表現(xiàn)，其主要病理結(jié)局是少突膠質(zhì)細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷并且髓鞘形成障礙。OLIG1作為少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子，可促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞增殖、分化以及髓鞘的成熟。然而，OLIG1與PVL的少突膠質(zhì)細(xì)胞及髓鞘化是否有關(guān)，目前尚不清楚。闡明該問題，對(duì)PVL的預(yù)防及其治療有重要意義。
　　方法：
　　將80只3日齡新生大

2、鼠隨機(jī)分為模型組及對(duì)照組，每組各40只。模型組建立PVL動(dòng)物模型，結(jié)扎3日齡新生大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈后低氧2h（8％氧氣和92％氮?dú)獾幕旌蠚怏w）;對(duì)照組不結(jié)扎僅分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，也不低氧。于實(shí)驗(yàn)后1、3、7、14、21d分別留取腦組織標(biāo)本，采用HE染色及透射電鏡觀察腦組織形態(tài)學(xué)改變，免疫組織化學(xué)、免疫熒光雙染、Westernblot和Real-TimePCR等分子生物學(xué)技術(shù)，檢測(cè)腦組織少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子OLIG1、髓鞘化標(biāo)志蛋白MBP的基

3、因和蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　透射電鏡發(fā)現(xiàn)模型組3d少突膠質(zhì)細(xì)胞的胞膜及核膜開始破損，導(dǎo)致細(xì)胞萎縮變形，繼之胞核固縮、碎裂后溶解，最終21d細(xì)胞壞死。模型組髓鞘在3d時(shí)開始有小空泡的形成，繼之板層之間較松懈，最終21d有些髓鞘甚至出現(xiàn)分層現(xiàn)象;通過免疫熒光雙標(biāo)發(fā)現(xiàn)缺血缺氧致PVL后OLIG1的表達(dá)發(fā)生了核轉(zhuǎn)移，由胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到了胞核;Weasternblotting和Real-TimePCR發(fā)現(xiàn)缺血缺氧后OLIG1、MB