過氧化氫和Bestatin誘導(dǎo)巴西橡膠樹乳管分化的研究.pdf

1、天然橡膠生產(chǎn)中普遍使用乙烯利刺激以增加天然橡膠產(chǎn)量。但是，乙烯利刺激不影響橡膠生物合成關(guān)鍵酶的基因表達(dá)，表明橡膠生物合成不被乙烯調(diào)節(jié)，其增產(chǎn)效應(yīng)與延長(zhǎng)排膠時(shí)間有關(guān)。乳管是橡膠合成和貯存的地方，乳管數(shù)量與天然橡膠產(chǎn)量密切相關(guān)，因此巴西橡膠樹的乳管分化機(jī)制是天然橡膠生產(chǎn)中的一個(gè)重大理論問題。機(jī)械傷害和外源茉莉酸均能誘導(dǎo)橡膠樹乳管分化，推測(cè)機(jī)械傷害通過激活茉莉酸信號(hào)途徑而誘導(dǎo)乳管分化。但對(duì)其中的信號(hào)環(huán)節(jié)仍不清晰。 本研究采用實(shí)驗(yàn)形態(tài)學(xué)

2、、生理學(xué)和分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)手段，利用我們建立的機(jī)械傷害誘導(dǎo)乳管分化的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，研究過氧化氫和亮氨酸氨肽酶抑制劑Bestatin對(duì)橡膠樹乳管分化的影響，并克隆膠乳亮氨酸氨肽酶的基因和研究割膠對(duì)該基因表達(dá)的影響。 機(jī)械傷害和外施茉莉酸甲酯能在7天內(nèi)誘導(dǎo)乳管分化，但機(jī)械傷害后馬上用封口膜包裹刮傷表面，不暴露傷口，在7天內(nèi)沒有乳管分化；然而，加入0.2mol/L過氧化氫一直包裹傷口能夠誘導(dǎo)乳管分化。機(jī)械傷害后，在傷口表面加1mmol/

3、L磷酸鹽緩沖液，馬上用封口膜包裹傷口表面2小時(shí)，然后暴露2小時(shí)，再用封口膜包裹，在7天內(nèi)誘導(dǎo)乳管分化，但在同樣處理?xiàng)l件下，加入NADPH氧化酶的抑制劑DPI沒有乳管分化。0.1mol/L過氧化氫誘導(dǎo)乳管分化的效應(yīng)明顯比0.2mol/L過氧化氫弱。機(jī)械傷害影響樹皮內(nèi)源茉莉酸和過氧化氫的含量。在機(jī)械傷害后4小時(shí)，內(nèi)源茉莉酸的含量達(dá)到高峰，隨后迅速下降，在機(jī)械傷害后1小時(shí)，過氧化氫含量達(dá)到高峰。氨肽酶的抑制劑Bestatin也能夠誘導(dǎo)次生乳管