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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br> 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)是一種嚴(yán)重危害人類健康的致病因子,是慢性肝炎、肝硬變和肝細(xì)胞癌最重要的病因之一。HBV傳染性強(qiáng),傳播途徑復(fù)雜,流行廣,感染率高,HBV感染已成為全球性的健康問題。據(jù)估計(jì),目前全世界約有20億人感染HBV,約有3.5億人為慢性HBV感染,每年約有100萬(wàn)人死于HBV感染所致疾病。而我國(guó)是乙型肝炎的高發(fā)區(qū),大多數(shù)HBV感染在兒童時(shí)期即已發(fā)生,8%~10%的成
2、年人口受到慢性感染。衛(wèi)生部公布的2011年法定傳染病疫情報(bào)告中,乙型肝炎的發(fā)病人數(shù)達(dá)109萬(wàn)人,居乙類傳染病之首,發(fā)病人數(shù)在近年來(lái)呈持續(xù)上升趨勢(shì),于2007年達(dá)發(fā)病高峰后維持在較高水平。乙肝給病人、家庭、社會(huì)造成沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),給社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來(lái)不容忽視的影響,是許多家庭因病致貧、因病返貧的重要原因,同時(shí)也引發(fā)一系列社會(huì)問題。乙肝感染呈世界性流行,我國(guó)一般人群的乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,H
3、BsAg)陽(yáng)性率為7.18%。不同國(guó)家、不同地區(qū)、不同社會(huì)群體的HBV感染率差異很大。HBV感染已成為極其重要的公共衛(wèi)生問題,防治肝炎已是關(guān)系到民族興衰的一件大事。
乙型肝炎病毒為嗜肝DNA病毒,以3種不同形式存在,分別為大球形顆粒、小球形顆粒及管形顆粒。大球形顆粒又稱Dane顆粒,是具有完整感染性病毒顆粒。HBV的抗原組成包括HBsAg.HBeAg.HBcAg,可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,其中HBsAb是保護(hù)性抗體。HBV
4、通過注射或破損的皮膚、粘膜進(jìn)入機(jī)體后,通過血流到達(dá)肝臟和其他器官。HBV在肝外組織中可潛伏下來(lái)并導(dǎo)致相應(yīng)病理及免疫功能的改變。HBV引起肝組織損傷的確切機(jī)制還不清楚,可能原因是受感染的肝細(xì)胞膜上HBsAg.HBeAg.HBcAg和HLA-Ⅰ類抗抗原存在雙重表達(dá),被HBV抗原致敏的HLA-Ⅰ類抗原限制的細(xì)胞毒性CD8+細(xì)胞可通過雙重識(shí)別作用致使肝細(xì)胞溶解;同時(shí)輔助性CD4+細(xì)胞通過其表面的HLA-Ⅱ類受體與B細(xì)胞表達(dá)的HBV抗原相結(jié)合而被
5、激活,并反過來(lái)促進(jìn)B細(xì)胞釋放HBsAb而清除HBV,細(xì)胞毒性T細(xì)胞可吸引或激發(fā)炎癥細(xì)胞,誘發(fā)肝細(xì)胞凋亡。乙肝慢性化的發(fā)生機(jī)制可能與免疫耐受和遺傳因素有關(guān),HBV X基因反式激活作用與HBV導(dǎo)致的肝細(xì)胞癌有關(guān)。感染HBV后免疫反應(yīng)比較復(fù)雜,不同個(gè)體乙肝感染后的病程差異較大,在急性和慢性HBV感染中均有可能出現(xiàn)肝功能的損傷。
HBV血清標(biāo)志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAg和HBcAb)和HBV DNA的檢測(cè)是
6、診斷乙肝感染的主要依據(jù),但HBV DNA的檢測(cè)設(shè)備昂貴,環(huán)境要求高,因此很難普及。金標(biāo)法敏感性低,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)在臨床應(yīng)用比較廣泛,化學(xué)發(fā)光微粒子法(CMIA)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的血清學(xué)檢測(cè)方法,本實(shí)驗(yàn)的目的是通過對(duì)HBV標(biāo)志物(用CMIA、ELISA兩種方法)和肝功能的檢測(cè),了解健康體檢人群的乙肝感染狀況和各種感染模式與肝功能的關(guān)系,以及兩種不同的HBsAg檢測(cè)方法的差異。
實(shí)驗(yàn)方法:
采集37
7、80名健康體檢者血清標(biāo)本,分別按不同性別和年齡分組(18~30歲、31~40歲、41~50歲和51歲以上四組),用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析(CMIA)檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物(HBSM)即表面抗原(HBsAg)、表面抗體(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗體(HBeAb)和核心抗體IgG(HBcAb-IgG),用速率法檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),用釩酸鹽法檢測(cè)總膽紅素(TBIL),分析各種感染模式與肝功能的關(guān)系;對(duì)CMIA法檢測(cè)HBsAg
8、陽(yáng)性的標(biāo)本用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)HBsAg。對(duì)取得的數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS13.0軟件處理,計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1、不同性別HBV感染率3780例受檢者中HBsAg陽(yáng)性124例,陽(yáng)性率為3.28%,其中男性64例,陽(yáng)性率為3.18%,女性60例,陽(yáng)性率為3.39%,不同性別HBsAg陽(yáng)性率無(wú)明顯差異(P>0.05)。
2、不同年齡組HBV感染率不同年齡組HBV感染率有明顯差
9、異(x2=125.8,P<0.01),41~50歲年齡組最高(6.23%),18~30歲和51歲以上年齡組較低,分別為2.94%和1.84%,31~40歲組為3.26%。各年齡組兩兩比較,41~50歲與其他組HBV感染率差異有顯著性(P<0.05),而其他年齡組間感染率無(wú)明顯差異。
3、HBV感染模式和肝功能異常檢出率HBV標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)5種模式:包括“1、4、5”、“1、3、5”、“1、5”三種常見模式和“1、3、4
10、、5”、“1、3”兩種少見模式。其中“1、4、5”模式占有率最高(69.4%),其它四種模式的占有率依次為15.3%、13.7%、0.8%、0.8%。HBV感染者中ALT或TBIL單項(xiàng)升高及二者均升高者占22.6%,其中“1、4、5”模式有14例,占11.3%,“1、3、5”模式有5例,占4.0%,“1、5”模式有8例,占6.5%。
4、CMIA法和ELISA法測(cè)定HBsAg結(jié)果124例CMIA法檢測(cè)HBsAg陽(yáng)性標(biāo)本用E
11、LISA法檢測(cè)陽(yáng)性117例,陽(yáng)性符合率為94.4%,其中有5例ELISA檢測(cè)HBsAg陰性的標(biāo)本用CMIA檢測(cè)結(jié)果HBsAg低于1 IU/ml。
結(jié)論:
1、健康體檢人群HBV感染率3.28%,低于全國(guó)平均水平,不同性別乙肝感染率無(wú)明顯差異,不同年齡組乙肝感染率差異較大,乙肝感染率與乙肝疫苗接種率有關(guān)。
2、HBV感染以慢性感染為主,肝功能與乙肝感染病程不呈平行關(guān)系。CMIA法較ELISA法檢測(cè)
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