PAPP-A通過(guò)IGF-1信號(hào)途徑下調(diào)膽固醇流出相關(guān)蛋白的表達(dá).pdf

1、目的：研究顯示PAPP-A通過(guò)IGF-1激活PI3-K/Akt信號(hào)通路發(fā)揮促動(dòng)脈粥樣硬化（As）發(fā)生發(fā)展的作用，此外IGF-1還可通過(guò)MAPK信號(hào)通路促進(jìn)As發(fā)生發(fā)展。本文觀察PAPP-A對(duì)THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞ABCA1、ABCG1和SR-B1表達(dá)及其介導(dǎo)膽固醇流出的影響，并探討其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞經(jīng)不同濃度PAPP-A（0，10，50，250 ng/mL）處理或者用250ng/mL P

2、APP-A共處理不同時(shí)間（0，6，12，24h）;運(yùn)用液體閃爍計(jì)數(shù)器檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出和磷脂流出，高效液相色譜分析細(xì)胞內(nèi)總膽固醇、游離膽固醇和膽固醇酯含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)ABCA1、ABCG1、SR-B1和LXRα、IGFBP-5 mRNA和蛋白表達(dá)情況。以PI3-K抑制劑或MAPK阻斷劑或轉(zhuǎn)染IGF-1R siRNA對(duì)PAPP-A作用下的細(xì)胞共處理24小時(shí)，觀察對(duì)ABCA1、ABCG1、SR-B1及

3、LXRα表達(dá)的影響。250ng/mL PAPP-A處理THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞24h，ELISA檢測(cè)培養(yǎng)液中IGF-1的濃度，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)IGF-1 mRNA表達(dá)情況，Western blot檢測(cè)PAPP-A對(duì)PI3-K和Akt磷酸化水平的影響
　　結(jié)果：PAPP-A抑制ABCA1、ABCG1和SR-B1的表達(dá)及其介導(dǎo)的膽固醇流出和磷脂流出；LXRα介導(dǎo)了PAPP-A抑制ABCA1、ABCG1和SR-B1的表