菜豆普通細菌性疫病抗病基因發(fā)掘與定位.pdf

1、菜豆普通細菌性疫病是目前普通菜豆生產(chǎn)中的重要病害，嚴重威脅著普通菜豆生產(chǎn)。篩選抗病種質(zhì)資源、開發(fā)與抗性基因緊密連鎖的分子標(biāo)記、克隆抗病基因、選育和種植抗病品種等，是防治菜豆普通細菌性疫病的最經(jīng)濟安全有效的方法。為發(fā)掘我國普通菜豆資源中的抗病基因，本文從資源鑒定、作圖群體構(gòu)建、遺傳圖譜構(gòu)建、抗病QTL檢測等方面，開展菜豆普通細菌性疫病抗病性研究，主要取得如下進展:
　　1.普通菜豆種質(zhì)資源抗病性鑒定
　　采用針刺葉片法接種、溫

2、室地面水層保濕方式，對661份普通菜豆種質(zhì)資源進行抗菜豆普通細菌性疫病鑒定和評價，結(jié)果表明，采用的接種方法簡便實用，保濕方式效果良好，從661份普通菜豆種質(zhì)中篩選出抗病種質(zhì)5份、中抗種質(zhì)82份、感病種質(zhì)400份、高感種質(zhì)174份。
　　2.分離群體的構(gòu)建
　　利用抗病材料龍蕓豆5號和感病材料龍蕓豆4號配制雜交組合，獲得包含463個單株的F2分離群體;采用針刺葉片接種法、溫室地面水層保濕的方式進行抗病性鑒定，在接種后14d和2

3、1d，群體調(diào)查結(jié)果的偏度絕對值均小于1，該群體鑒定結(jié)果適于進行QTL定位。
　　3.連鎖圖譜的構(gòu)建
　　依據(jù)普通菜豆全基因組序列開發(fā)了2，802對SSR引物，獲得168個親本間具有多態(tài)性的標(biāo)記;從1,381個公共標(biāo)記中，篩選獲得49個親本間具有多態(tài)性的標(biāo)記。利用217個多態(tài)性標(biāo)記，分別對5個F1（龍4×龍5）單株的自交后代即F2群體進行遺傳分析，去除嚴重偏分離的標(biāo)記后，利用軟件QTL IciMapping v4.0分別構(gòu)建遺

4、傳連鎖圖，并將這些連鎖圖整合到一張圖譜上，得到212個SSR標(biāo)記覆蓋的整合遺傳圖譜。
　　4.抗病QTL的定位及遺傳效應(yīng)分析
　　結(jié)合表型和基因型鑒定結(jié)果，利用QTL IciMapping v4.0軟件在接種后14d和21d同時檢測到兩個QTL。位于B08染色體的p8s214與p8s193標(biāo)記之間的QTL在14d和21d分別解釋4.2％和3.8％的表型變異;位于B11染色體的p11s225與p11s229標(biāo)記之間的QTL在1

5、4d和21d分別解釋9.2％和5.7％的表型變異。
　　通過上位性分析，接種后14 d和21d分別發(fā)現(xiàn)35對和58對具有互作效應(yīng)的QTL，其中有2對（E-Q1和E-Q2）在14 d和21 d同時被檢測到，分別位于p8s192/BMg985和p3s3/p3s9、p3s262/p3s185和BMg1叭9/p4s19位點之間;在14d和21 d，E-Q1分別解釋18.8％和43.5％的表型變異，E-Q2分別解釋24.8％和50.4％的表