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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察藥物帕歌斯(Pagosid,PGS)對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠脊髓中神經(jīng)絲蛋白(Neurofilament protein,NFP)和腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)表達(dá)的影響,研究其對(duì)多發(fā)性硬化的(multiple sclerosis,MS)是否具有保護(hù)效用及其作用機(jī)制,
2、尋找治療MS的更佳手段。
方法:
60只Wistar雌性大鼠隨機(jī)分為4組:正常組(N組)、EAE模型組(EAE組)、小劑量PGS組(EAE+PGS20mg/kg.d,PGS1組)、大劑量PGS組(EAE+PGS100mg/kg.d, PGS2組)。使用豚鼠脊髓勻漿( Guinea pig spinal cord homogenate,GPSCH)制備EAE模型。N組不予任何處理;EAE組、PGS1組和PGS2組大鼠在
3、抗原免疫后根據(jù)處死時(shí)間不同,各自在組內(nèi)又分為第7天、第14天、第21天處死的三個(gè)亞組,EAE組不予給藥,PGS1組和PGS2組從免疫后當(dāng)天起,分別每天給予相應(yīng)劑量的帕歌斯灌胃一次至處死。觀察每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)病情況并給予神經(jīng)系統(tǒng)功能評(píng)分。處死后取大鼠脊髓組織切片HE染色后在光鏡下進(jìn)行炎性病灶計(jì)數(shù)。免疫組化方法檢測(cè)各組大鼠脊髓組織中NFP和TNF-α的表達(dá)。
結(jié)果:
1.各組實(shí)驗(yàn)鼠發(fā)病率:N組無(wú)大鼠發(fā)??;EAE組發(fā)病率為8
4、8.89%;PGS1組和PGS2組動(dòng)物發(fā)病率明顯低于EAE組(P<0.05);PGS2組發(fā)病率則低于PGS1組(P<0.05)。
2.神經(jīng)功能分值比較:免疫后第7天、第14天、第21天分別給予評(píng)分,在第14天、第21天PGS1、PGS2組評(píng)分均小于EAE組,第14天PGS2組神經(jīng)功能評(píng)分小于PGS1組,差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而從三個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行比較,7天組、21天組與14天組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);7天與21
5、天組比較差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
3.脊髓病理改變:N組大鼠脊髓中未發(fā)現(xiàn)炎性細(xì)胞;其余3組大鼠脊髓內(nèi)均存在炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)。第14天、第21天,PGS1組和PGS2組炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)少于同期的EAE組(P<0.05);PGS2組少于同期PGS1組(P<0.05);而7天時(shí)間點(diǎn)PGS1組與EAE組并無(wú)明顯差別(P>0.05);各組內(nèi)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較,第7天、第21天與第14天相比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);第7天與第2
6、1天比較,不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
4.脊髓NFP和TNF-α的表達(dá):4組均有NFP的表達(dá),N組脊髓NFP高表達(dá)但無(wú)TNF-α陽(yáng)性表達(dá);EAE組、PGS1組、PGS2組均存在TNF-α的陽(yáng)性表達(dá)。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比較:PGS1組、PGS2組NFP高于同期EAE組,TNF-α表達(dá)低于同期EAE組(P<0.05);第14天PGS2組中TNF-α陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目低于PGS1組,NFP陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)高于 PGS1組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
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